Anticorps polyclonal de lapin anti-GSDME (forme entière + extrémité N) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O60443

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GSDME

• GSDME (DFNA5/ICERE-1), codée par le gène GSDME, est une protéine précurseur formatrice de pores de la famille des gasdermines qui convertit l'apoptose non inflammatoire en pyroptose.
  Références associées : PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:33852854
• Après clivage par la caspase-3 (CASP3) ou la granzyme B (GZMB), le fragment N-terminal se transloque vers la membrane plasmique, s'oligomérise et forme des pores d'un diamètre interne de 10 à 15 nm, facilitant la libération d'IL-1β et d'IL-18 et déclenchant la mort cellulaire pyroptotique.
  Références associées : PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:33852854
• GSDME agit comme un interrupteur critique qui convertit l'apoptose induite par le TNF ou par chimiothérapie en pyroptose, et elle est impliquée dans la nécrose secondaire lors d'infections virales.
  Références associées : PMID:27281216, PMID:28459430, PMID:32188940, PMID:28045099
• La protéine présente une activité bactéricide et contribue à la nécrose secondaire en aval de la voie apoptotique mitochondriale.
  Références associées : PMID:27281216, PMID:28045099
• En tant que suppresseur de tumeur, GSDME facilite la pyroptose médiée par la granzyme B dans les cellules tumorales, favorisant ainsi une immunité antitumorale robuste et la régression tumorale par les cellules natural killers.
  Références associées : PMID:21522185, PMID:32188940, PMID:31953257
• GSDME est exprimée dans la cochlée et de nombreux autres tissus, avec une expression maximale dans le placenta ; des mutations sont à l'origine d'une surdité non syndromique autosomique dominante (DFNA5).
  Références associées : PMID:9771715
• Épissage alternatif produit plusieurs isoformes de poids moléculaires d'environ 11, 35 et 55 kDa.
• La forme entière de GSDME se localise majoritairement dans le cytoplasme et le cytosol ; après clivage, le fragment N-terminal s'associe à la membrane cellulaire pour exercer sa fonction de formation de pores.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour l'analyse par Western blot (WB), attendez des bandes correspondant aux isoformes de GSDME à environ 11, 35 et 55 kDa. Utilisez des contrôles positifs tels que des lignées cellulaires traitées avec des inducteurs de pyroptose (par exemple des agents de chimiothérapie) pour confirmer la détection spécifique.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), une optimisation des conditions de récupération d'antigène et de perméabilisation peut être nécessaire. Validez la spécificité de l'anticorps à l'aide d'un peptide de blocage ou de tissu issu de modèles knock-out lorsque c'est possible.
• Pour l'ELISA et d'autres dosages quantitatifs, envisagez d'associer cet anticorps polyclonal à un anticorps de détection monoclonal apparié pour concevoir un dosage sandwich robuste.
• En tant qu'anticorps polyclonal de lapin, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée pour les expériences critiques. Il est recommandé d'inclure des contrôles négatifs appropriés (par exemple l'anticorps secondaire seul) pour évaluer le bruit de fond de coloration.

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