Anticorps polyclonal anti-GSDMD pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P57764

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GSDMD

• GSDMD est une protéine précurseur formatrice de pores et un exécuteur clé de la pyroptose en aval de l'activation de l'inflammasome.
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• Le clivage protéolytique par la caspase-1, -4 ou -5 libère le domaine N-terminal, qui s'oligomérise pour former des pores de 10 à 15 nm au niveau de la membrane plasmique.
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• Ces pores médient la sécrétion de l'IL-1β et de l'IL-18 matures, déclenchant la mort cellulaire inflammatoire (pyroptose).
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• Le fragment N-terminal se lie spécifiquement aux phospholipides acides tels que la cardiolipine, les phosphates de phosphatidylinositol, l'acide phosphatidique et la phosphatidylsérine, mais pas aux lipides neutres.
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• GSDMD exerce une activité bactéricide directe en formant des pores sur les bactéries Gram-positives et Gram-négatives.
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• Le clivage par la papaïne, un allergène, génère un fragment qui libère sélectivement l'IL-33, induisant l'immunité de type 2.
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• Un variant de clivage dépendant de la caspase-3/7 dans l'intestin grêle agit comme coactivateur transcriptionnel, favorisant la tolérance immune via l'induction de CIITA et de CMH-II.
• GSDMD est exprimé abondamment dans les cellules épithéliales en différenciation de l'œsophage et de l'estomac, et se localise dans le cytosol, l'inflammasome, la membrane plasmique, les mitochondries et le noyau.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 346 à 484 de la GSDMD humaine, ciblant la portion C-terminale ; par conséquent, l'anticorps reconnaît la forme complète (~53 kDa) et le fragment C-terminal clivé par la caspase (~30 kDa), mais pas le domaine N-terminal formateur de pores.
• En Western blot, une bande dominante d'environ 53 kDa est attendue ; après activation de l'inflammasome, une bande plus petite (~30 kDa) correspondant au produit de clivage C-terminal peut également être visible.
• Pour l'immunofluorescence et l'immunohistochimie, optimisez la fixation et la perméabilisation pour détecter GSDMD dans ses différentes localisations sous-cellulaires (cytosol, membrane, mitochondries, noyau).
• Cet anticorps polyclonal est parfaitement adapté pour l'immunoprécipitation de GSDMD complète et de ses partenaires de liaison.
• Dans les systèmes ELISA, il peut servir d'anticorps de capture ou de détection ; l'associer à un anticorps GSDMD spécifique du domaine N-terminal permet de différencier les formes intactes et traitées.

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