Anticorps polyclonal de lapin anti-GSDMD (pleine longueur + extrémité N) pour WB, IF/ICC, ELISA - P57764

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Gasdermine-D

• La Gasdermine-D (GSDMD) est un membre de la famille des gasdermines, également appelée protéine 1 contenant un domaine gasdermine, codée par le gène GSDMD (également connu sous les noms DFNA5L, GSDMDC1, FKSG10). Elle agit principalement comme précurseur d'une protéine formatrice de pores indispensable à la pyroptose et à la défense de l'hôte contre les pathogènes.
• Lors de l'activation de l'inflammasome canonique ou non canonique, les caspases inflammatoires (CASP1, CASP4, CASP5) clivent la GSDMD, libérant le fragment N-terminal formant de pores de l'autoinhibition.
  Références associées : PMID:26375003 PMID:26375259 PMID:27418190
• Le fragment N-terminal libéré se transloque vers la membrane plasmique, se lie fortement aux phosphoinositides (par exemple PI4P, PI(4,5)P2), à l'acide phosphatidique et à la phosphatidylsérine, mais pas aux phospholipides non chargés, où il s'oligomérise en pores de 10 à 15 nm.
  Références associées : PMID:27281216 PMID:29898893 PMID:36227980
• Ces pores médient la libération de l'IL‑1β et de l'IL‑18 matures, des cytokines essentielles à la réponse inflammatoire, et peuvent également éliminer la caspase‑7 mature et l'ADN mitochondrial (ADNmt).
  Références associées : PMID:27281216 PMID:27418190 PMID:29898893
• Dans certains types cellulaires, la mort cellulaire par pyroptose s'ensuit via l'activation en aval de la ninjurine‑1 (NINJ1), conduisant à la rupture de la membrane plasmique.
  Références associées : PMID:33472215 PMID:37198476
• Au-delà de son rôle lytique, les fragments N-terminaux de la GSDMD peuvent tuer directement les bactéries Gram-négatives et Gram-positives extracellulaires, et dans des conditions de culture cellulaire, restreignent les pathogènes intracellulaires comme Listeria monocytogenes.
  Références associées : PMID:27281216
• Dans l'intestin grêle, le clivage par CASP3 ou CASP7 produit un coactivateur transcriptionnel qui se transloque vers le noyau, s'associe à STAT1 pour induire l'expression de CIITA et du CMH de classe II, maintenant ainsi la tolérance alimentaire. (Par similarité)
• Le clivage par l'allergène de papaïne génère également le fragment N-terminal formant de pores, qui libère spécifiquement l'IL‑33 mature, favorisant l'immunité de type 2.
  Références associées : PMID:35794369
• La GSDMD est largement exprimée, avec une présence notable dans les cellules œsophagiennes suprabasales et l'isthme/col, les cryptes et les glandes gastriques, et se localise dans le cytoplasme, l'inflammasome, la membrane plasmique, les mitochondries et le noyau dans diverses conditions.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting, l'anticorps reconnaît un épitope situé entre les acides aminés 154 et 252 du domaine N-terminal ; ainsi, à la fois la GSDMD pleine longueur (environ 53 kDa prédite) et le fragment N-terminal clivé (environ 31-34 kDa) peuvent être détectés. Validez dans le système d'échantillon concerné et envisagez d'utiliser des lysats cellulaires activés par l'inflammasome pour observer les produits de clivage.
• En immunofluorescence / immunocytochimie, la GSDMD peut se localiser dans le cytoplasme, la membrane plasmique et le noyau selon l'état d'activation. L'optimisation des conditions de perméabilisation et de fixation est recommandée. Incluez des contrôles appropriés pour confirmer la spécificité.
• Pour l'ELISA, la nature polyclonale permet une utilisation potentielle à la fois comme anticorps de capture et de détection dans les formats d'ELISA sandwich. L'association avec un anticorps monoclonal spécifique d'un épitope distinct peut améliorer la sensibilité. Une courbe étalon utilisant la protéine recombinante est conseillée.

CamelBio : Votre pont d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio est un partenaire complet pour les matières premières de DIV, fournissant des paires d'anticorps validées, des anticorps monoclonaux et polyclonaux optimisés et des réactifs auxiliaires en vrac aux fabricants de diagnostics et aux laboratoires de recherche. Dans le domaine de la pyroptose et de l'immunité innée, nous pouvons approvisionner les matériaux nécessaires au développement d'essais liés à la GSDMD, y compris les anticorps contre des cibles rares et les protéines recombinantes. Notre plateforme rationalisée aide à combler le fossé entre le concept et la clinique, garantissant une chaîne d'approvisionnement fiable pour vos projets de DIV.