Anticorps monoclonal de lapin anti-GSDMD (forme entière + extrémité C) pour WB, ELISA - P57764

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du GSDMD

• La Gasdermine-D (GSDMD) est un membre de la famille des gasdermines et sert de précurseur d'une protéine formant des pores, critique pour la pyroptose et la défense de l'hôte. Références connexes : PMID:26375003, PMID:26375259, PMID:27281216
• Lors du clivage par les caspases inflammatoires (CASP1/4/5), le fragment N-terminal transloque vers la membrane plasmique, se lie aux lipides de la couche interne tels que les phosphatidylinositol phosphates, et s'oligomérise pour former des pores de 10-15 nm, libérant l'IL-1β et l'IL-18 et déclenchant la pyroptose. Références connexes : PMID:27281216, PMID:27418190, PMID:29898893
• Les pores de GSDMD médient également la perméabilisation de la membrane mitochondriale, entraînant la libération d'ADNmt, et le fragment N-terminal présente une activité bactéricide directe contre les bactéries Gram-négatives et Gram-positives. Références connexes : PMID:27281216
• Dans le petit intestin, un fragment clivé par CASP3/7 agit comme un coactivateur de transcription pour STAT1, favorisant l'expression de CIITA et du CMH de classe II pour maintenir la tolérance alimentaire.
• Le GSDMD est exprimé dans les cellules en différenciation de l'œsophage et de l'estomac, et son activation dans les cellules endothéliales cérébrales peut provoquer une rupture de la barrière hémato-encéphalique lors d'une pyroptose excessive.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la palmitoylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, et il appartient à la famille des gasdermines caractérisée par un domaine N-terminal conservé formant des pores.
• Le clivage par l'allergène papaine génère un fragment formant des pores qui libère spécifiquement l'IL-33, favorisant l'inflammation de type 2. Références connexes : PMID:35794369

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 346-484) correspond à la partie C-terminale ; par conséquent, cet anticorps peut reconnaître à la fois le GSDMD de forme entière et le fragment C-terminal clivé. Pour le Western blot, envisagez de valider la détection de la protéine endogène dans des conditions d'activation de l'inflammasome pour distinguer les espèces clivées.
• Une bande à environ 53 kDa représente le GSDMD de forme entière ; le clivage libère le domaine N-terminal formant des pores (~31 kDa) et le fragment C-terminal (~22 kDa). Utilisez des témoins appropriés (par exemple, macrophages traités au LPS+ATP) pour confirmer la spécificité.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut convenir comme réactif de capture ou de détection. Envisagez de le coupler avec un anticorps spécifique de l'extrémité N pour quantifier différemment le GSDMD de forme entière par rapport au GSDMD clivé. Optimisez empiriquement les conditions de revêtement et de blocage.
• Puisque le GSDMD forme des pores oligomériques, la solubilité et la conformation peuvent varier selon les types d'échantillons ; incluez des détergents doux et une sonication dans les tampons de lyse pour une extraction efficace.

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