Anticorps polyclonal anti-GRM1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13255

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du GRM1

• Le GRM1 code pour le récepteur métabotropique du glutamate 1, un récepteur couplé aux protéines G (RCPG) activé par le glutamate, le principal neurotransmetteur excitateur du système nerveux central.
• Lors de la liaison du ligand, le GRM1 se couple aux protéines G et active un système de second messager phosphatidyl-inositol-calcium, jouant des rôles critiques dans la plasticité synaptique tels que la potentialisation à long terme (LTP) dans l'hippocampe et la dépression à long terme (LTD) dans le cervelet (PubMed:24603153, PubMed:28886343, PubMed:7476890).
  Références connexes : PMID:24603153 PMID:28886343 PMID:7476890
• Dans les neurones dopaminergiques et les cellules de Purkinje du cervelet, la signalisation du GRM1 via la voie GNAQ-PLC-PKC induit l'activation des canaux cationiques de GRID1 et GRID2, respectivement (PubMed:24357660, PubMed:27276689).
  Références connexes : PMID:24357660 PMID:27276689
• La protéine est localisée à la membrane cellulaire, spécifiquement enrichie aux sites postsynaptiques et aux projections dendritiques, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transmission synaptique.
• Le GRM1 subit un épissage alternatif, générant des isoformes qui peuvent présenter des propriétés de signalisation distinctes. Les mutations de ce gène sont associées à des troubles du neurodéveloppement et neurodégénératifs, y compris les types d'ataxie spinocérébelleuse SCA44 et SCAR13.
• Le récepteur est principalement exprimé dans le tissu cérébral, où il module l'excitabilité neuronale et la force synaptique.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la phosphorylation et la formation de ponts disulfures, qui sont essentielles pour le repliement du récepteur, le trafic membranaire et la modulation du signal.
• En tant que RCPG de classe C, le GRM1 possède un grand domaine extracellulaire N-terminal contenant le module de liaison du ligand « piège à mouches de Vénus », relié au cœur transmembranaire 7, et une queue intracellulaire C-terminale impliquée dans les interactions protéiques et la régulation de la signalisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région intracellulaire C-terminale (acides aminés 920–1140) du GRM1 humain (isoforme NP_001264993.1). Cette région est distale par rapport aux domaines transmembranaires, ce qui rend l'anticorps adapté pour la détection des niveaux totaux de protéine GRM1 dans des conditions dénaturantes et natives.
• Pour le transfert Western (Western blotting, WB), une bande autour de 132 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux de tissu cérébral ou de lignées cellulaires neuronales (ex: SH-SY5Y, neurones primaires) et de vérifier la spécificité avec des contrôles de surexpression ou de knockout du GRM1.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), anticipez des motifs de coloration de la membrane plasmique et des dendrites ; la colocalisation avec des marqueurs synaptiques (ex: PSD-95) peut aider à confirmer la localisation postsynaptique.
• Lors de l'utilisation de l'ELISA, tenez compte de la conception de la paire d'anticorps et testez la réactivité croisée avec d'autres membres de la famille mGluR (ex: GRM5) si nécessaire, en raison de la conservation de la séquence dans la région C-terminale.
• Validez l'anticorps dans votre système d'échantillon spécifique, car les modifications post-traductionnelles et la formation de complexes protéiques peuvent affecter la détection.

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