Anticorps polyclonal Anti-GRK5 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P34947

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GRK5

• Encodée par le gène GRK5 (également connu sous le nom de GPRK5), la GRK5 est un membre de la famille des kinases des récepteurs couplés aux protéines G (GRK) qui phosphorylent spécifiquement les RCPG activés, initiant la désensibilisation et l'internalisation via le recrutement de la bêta-arrestine.
• Au-delà des RCPG, la GRK5 phosphorylise plusieurs substrats non récepteurs, notamment ST13 (régulant le trafic des récepteurs des chimiokines), TP53/p53 (inhibant l'apoptose), HDAC5 (favorisant l'export nucléaire et améliorant la transcription médiée par MEF2), ARRB1, et même LRP6 dans la signalisation Wnt.
• Au niveau subcellulaire, la GRK5 se localise dynamiquement dans le cytoplasme, le noyau et la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la régulation des récepteurs de la membrane plasmique et la modulation transcriptionnelle nucléaire.
• La distribution tissulaire est large mais enrichie : les niveaux les plus élevés sont détectés dans le cœur, le placenta et le poumon, avec une expression modérée dans le muscle squelettique, le cerveau, le foie, le pancréas et le rein.
• L'activité kinase est dépendante de l'ATP, et la protéine contient des domaines de liaison aux lipides, permettant l'association membranaire ; c'est également une phosphoprotéine soumise à des modifications régulatrices.
• Les mots-clés fonctionnels incluent la signalisation de l'apoptose, l'implication dans la voie Wnt et l'activité kinase sérine/thréonine, soulignant ses rôles multifonctionnels dans la signalisation cellulaire et la maladie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, préparez des lysats cellulaires totaux à partir de tissus à forte expression de GRK5 (par exemple, cœur, poumon). Une bande à environ 68 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; validez avec un lysat témoin positif.
• En immunohistochimie (IHC-P), une récupération d'antigène standard (par exemple, tampon citrate pH 6,0) peut être employée ; incluez des tissus positifs connus tels que le muscle cardiaque et des témoins négatifs pour évaluer la spécificité.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), des lignées cellulaires exprimant de manière endogène la GRK5 peuvent être utilisées. Les conditions de fixation/perméabilisation doivent être optimisées, et les études de colocalisation avec des marqueurs membranaires ou nucléaires peuvent confirmer la dynamique de localisation.
• En tant qu'anticorps polyclonal, il est recommandé de vérifier la cohérence d'un lot à l'autre pour les tests quantitatifs tels que l'ELISA. Utilisez la protéine recombinante GRK5 comme standard.

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