Anticorps monoclonal anti-GRK2 [Validé par KO] pour WB, IF/ICC, ELISA - P25098

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de GRK2

• GRK2 (kinase 2 des récepteurs couplés aux protéines G), également connue sous le nom de kinase 1 du récepteur bêta-adrénergique (BARK1), est une sérine/thréonine kinase qui phosphoryle spécifiquement les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) activés, initiant l'internalisation et la désensibilisation des récepteurs médiées par la β-arrestine (PubMed:14976224, PubMed:16179383, PubMed:19306925). Références associées : PMID:14976224 PMID:16179383 PMID:19306925
• Elle phosphoryle la forme occupée par un agoniste des récepteurs β-adrénergiques (ADRB2) et des récepteurs apparentés aux catécholamines, régulant les réponses de fréquence de contraction des cardiomyocytes et favorisant la désensibilisation des récepteurs (PubMed:19715378). Références associées : PMID:19715378
• GRK2 désensibilise les récepteurs des anaphylatoxines C3AR1 et C5AR1 lors de la liaison à leurs ligands, modulant ainsi les réponses des cellules immunitaires (PubMed:21799898, PubMed:23077507). Références associées : PMID:21799898 PMID:23077507
• Elle régule positivement la voie de signalisation ciliaire de smoothened (SMO) en phosphorylant SMO (facilitant son acheminement vers le cil) et GPR161 (favorisant son exportation ciliaire), deux événements clés de la signalisation Hedgehog (PubMed:39138140, PubMed:40384633). Références associées : PMID:39138140 PMID:40384633
• GRK2 module la signalisation de LPAR1 en entrant en compétition avec RALA pour la liaison au récepteur, affectant les propriétés de signalisation et désensibilisant LPAR1/LPAR2 d'une manière indépendante de la phosphorylation (PubMed:19306925). Références associées : PMID:19306925
• Au niveau subcellulaire, GRK2 se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire, les prolongements cellulaires (y compris la membrane ciliaire) et les compartiments synaptiques (postsynaptiques et présynaptiques), ce qui reflète la diversité de ses rôles régulateurs.
• L'expression tissulaire est détectée dans les leucocytes du sang périphérique, ce qui souligne son importance dans les systèmes immunitaire et cardiovasculaire.
• Ses principales caractéristiques moléculaires comprennent la liaison à l'ATP, la liaison aux nucléotides, l'activité kinase, la phosphorylation et l'activité transférase, comme annoté dans UniProt.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un peptide situé entre les résidus 590 et 689, ce qui suggère la reconnaissance d'un épitope linéaire ; le Western blot dénaturant (WB) et l'ELISA devraient donc donner de bons résultats.
• La validation par KO indique une forte spécificité ; il est recommandé d'utiliser des lysats de cellules knock-out pour GRK2 comme contrôle négatif en WB afin de confirmer l'identité de la bande.
• Une bande d'environ 80 kDa est attendue ; validez sa migration dans votre système d'échantillonnage à l'aide de marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• En immunofluorescence (IF/ICC), GRK2 présente un marquage membranaire et cytoplasmique ; veillez à assurer une perméabilisation adéquate et envisagez un co-marquage avec des marqueurs d'organites.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat rend cet anticorps adapté aux études menées sur des organismes modèles courants ; vérifiez le signal dans les tissus ou lignées cellulaires pertinents.
• GRK2 étant impliquée dans la désensibilisation des GPCR, des essais fonctionnels (par exemple, l'internalisation des récepteurs ou le recrutement de la β-arrestine) peuvent compléter les expériences de détection.

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