Anticorps polyclonal Anti-GRASP65 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9BQQ3

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GRASP65 (GORASP1)

• GRASP65 (GORASP1, GOLPH5) est une protéine structurelle clé de l'appareil de Golgi, appartenant à la famille GORASP. L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes. (Mots-clés : Épissage alternatif)
• Elle est nécessaire à la formation et à la maintenance du ruban de Golgi, agissant de concert avec GORASP2/GRASP55. Elle joue également un rôle dans l'assemblage et l'empilement des membranes des saccules, ainsi que dans le réassemblage des piles de Golgi après la désintégration mitotique.
  Références connexes :
  PMID:33301566
• Le clivage médié par la caspase de GRASP65 est nécessaire pour la fragmentation de l'appareil de Golgi lors de l'apoptose. (Par similarité)
• GRASP65 médie, par interaction avec GOLGA2/GM130, l'amarrage des vésicules de transport avec les membranes de l'appareil de Golgi.
  Références connexes :
  PMID:16489344
• Elle facilite le trafic non conventionnel induit par le stress du réticulum endoplasmique (RE) du CFTR à cœur glycosylé vers la membrane cellulaire.
  Références connexes :
  PMID:21884936
• Au niveau subcellulaire, GRASP65 se localise dans l'appareil de Golgi, spécifiquement sur la membrane du réseau cis-Golgi et sur la membrane du compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi (ERGIC).
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, la myristoylation et la liaison au zinc. La protéine est une phosphoprotéine, une lipoprotéine et une protéine de liaison aux métaux.

Guidance expérimentale et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 221–440 de la GRASP65 humaine, situés dans la région C-terminale. Lors de la prédiction de la reconnaissance des isoformes, tenez compte des variants d'épissage potentiels affectant ce domaine.
• Pour le transfert Western (Western blotting, WB), validez l'anticorps sur des lignées cellulaires humaines ; la GRASP65 endogène migre à environ 46 kDa. Des fragments de clivage peuvent apparaître lors de l'apoptose — utilisez des témoins appropriés (par exemple, cellules traitées à la staurosporine).
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), optimisez la fixation (par exemple, méthanol ou paraformaldéhyde) et la perméabilisation pour obtenir une coloration claire de l'appareil de Golgi. Une coloration simultanée avec un marqueur de Golgi (par exemple, GM130) est recommandée.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; effectuez un titrage pour déterminer la concentration optimale pour votre système de dosage.

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