Anticorps polyclonal anti-Granzyme B pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P10144

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Granzyme B

• La Granzyme B, également connue sous les noms de C11, CTLA-1, Cathepsine G-like 1 (CTSGL1), Fragmentin-2 et HLP, est une sérine protéase codée par le gène GZMB chez l'homme. C'est un composant clé des granules des cellules T cytotoxiques et des cellules NK.
• Cette protéase clive spécifiquement après les résidus d'acide aspartique, une préférence de substrat qu'elle partage avec les caspases, ce qui lui permet d'activer plusieurs voies de mort en aval. Références connexes : PMID:1985927, PMID:8258716
• Lors de sa délivrance dans les cellules cibles via la synapse immunologique, la Granzyme B clive directement la gasdermine-E (GSDME), libérant son domaine de formation de pores pour déclencher la pyroptose, une forme hautement inflammatoire de mort cellulaire programmée. Références connexes : PMID:31953257, PMID:32188940
• La Granzyme B active également de manière protéolytique les caspases-3, -9 et -10, reliant ainsi la cytotoxicité médiée par l'exocytose des granules à l'exécution de l'apoptose classique. Références connexes : PMID:9852092
• Dans le contexte d'une infection bactérienne, la Granzyme B peut cliver et activer la caspase-7 (CASP7) pour faciliter la réparation de la membrane plasmique, une fonction déduite de la similarité de séquence.
• Au niveau subcellulaire, la Granzyme B est stockée dans les granules cytolytiques et sécrétée à partir de ceux-ci ; elle contient un peptide signal N-terminal et subit une activation de zymogène avant d'acquérir une activité protéolytique complète.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation N-liée et la formation de ponts disulfures, toutes deux critiques pour un repliement, un trafic et une stabilité appropriés.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique correspondant aux résidus 100–200 de la Granzyme B humaine. Cela entraîne probablement un anticorps qui reconnaît un épitope linéaire, le rendant bien adapté aux applications dénaturantes telles que le WB.
• Pour le WB, envisagez de valider la détection d'une bande majeure à environ 28kDa dans des conditions réductrices, correspondant au zymogène ou à la Granzyme B mature. Les intermédiaires de traitement peuvent apparaître à des poids moléculaires inférieurs.
• Compte tenu de sa réactivité croisée avec la Granzyme B de souris, l'anticorps peut être utilisé dans des modèles de tissus ou de cellules de souris, mais les utilisateurs doivent valider les performances spécifiques à l'espèce dans leur système expérimental.
• En IHC-P et IF-P, optimisez la récupération de l'antigène et la dilution de l'anticorps, car l'épitope peptidique peut être sensible aux conditions de fixation et d'inclusion.
• Pour ELISA, les formats de liaison directe ou en sandwich peuvent nécessiter des tests d'appariement préliminaires ; la nature polyclonale peut permettre une amplification du signal mais peut également augmenter le bruit de fond si elle n'est pas correctement titrée.

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