Anticorps monoclonal anti-GPRC5D pour cytométrie en flux - Q9NZD1

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de GPRC5D

• GPRC5D (récepteur couplé aux protéines G, famille C, groupe 5, membre D) est un membre de la famille des RCPG et est codé par le gène GPRC5D.
• Ce récepteur intervient principalement dans la régulation de l’expression de la kératine dure et jouerait un rôle essentiel dans le développement et le maintien des cheveux et des ongles.
• Au niveau cellulaire, GPRC5D est localisé sur la membrane cellulaire, ce qui est cohérent avec sa fonction de transducteur de signal transmembranaire.
• Le profil d’expression tissulaire révèle une distribution étendue dans les tissus périphériques : expression élevée dans le pancréas ; moyenne dans le rein, l’intestin grêle, la rate et les testicules ; faible dans le poumon, le côlon, les leucocytes, la prostate et le thymus. Il n’est pas détecté dans le cerveau, le cœur, le foie, le placenta, le muscle squelettique ou l’ovaire.
• La protéine subit un épissage alternatif, produisant des isoformes pouvant expliquer les différents poids moléculaires observés (34 à 38 kDa).
• Ses principales caractéristiques structurales comprennent une topologie à sept domaines transmembranaires, typique des récepteurs couplés aux protéines G, ainsi que la présence d’un vaste domaine extracellulaire N-terminal.
• Les mots-clés UniProt soulignent son rôle de récepteur et de transducteur, ainsi que son association avec la membrane cellulaire ; elle a été identifiée par protéomique et possède le statut de protéome de référence.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Cet anticorps a été produit à l’aide d’un peptide synthétique immunogène correspondant au domaine extracellulaire N-terminal (acides aminés 1 à 100). Il peut reconnaître toutes les isoformes connues de GPRC5D, mais l’accessibilité de l’épitope peut varier selon la conformation ou la glycosylation.
• Pour la cytométrie en flux (FC), réalisez une expérience de titration afin de déterminer la concentration optimale d’anticorps pour votre type cellulaire. Utilisez des contrôles d’isotype appropriés ainsi qu’une discrimination des cellules vivantes et mortes.
• Le fluorophore est brillant et photostable ; minimisez l’exposition à la lumière pendant la manipulation et utilisez, lorsque cela est possible, des échantillons fraîchement préparés.
• Compte tenu du profil d’expression tissulaire, les lignées cellulaires ou les cellules primaires dérivées du pancréas, du rein ou des organes immunitaires peuvent servir de contrôles positifs ; l’absence d’expression dans le cerveau ou le foie peut être utilisée pour sélectionner des contrôles négatifs.
• Si des signaux faibles sont observés, envisagez de tester différents protocoles de fixation et de perméabilisation, car l’épitope est situé dans la région N-terminale.

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