Anticorps polyclonal anti-GPR4 pour WB, ELISA - P46093

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de GPR4

• GPR4, également connu sous le nom de GPR6C.l, est un membre de la famille des récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) sensibles aux protons, qui détectent l’acidification extracellulaire dans la plage physiologique de pH comprise entre 6,8 et 7,2. Références associées : PMID:12955148 PMID:17462861 PMID:33478938 PMID:39753132

• Lorsqu’il est activé, GPR4 transmet principalement des signaux par l’intermédiaire des protéines Gs afin de stimuler l’activité de l’adénylate cyclase et la production d’AMPc ; il peut également se coupler aux protéines G Gi, Gq et G12/13. Références associées : PMID:12955148 PMID:17462861 PMID:20211729

• Dans le noyau rétrot trapézoïde du cerveau, GPR4 agit comme un capteur essentiel du CO2/H+ qui régule la commande respiratoire (par analogie).

• Dans les reins, GPR4 maintient l’homéostasie acido-basique en modulant la sécrétion d’acide dans le canal collecteur (par analogie).

• Dans des conditions acides, l’activation de GPR4 augmente la formation de jonctions intercellulaires et la perméabilité des cellules endothéliales vasculaires par l’intermédiaire de la voie de signalisation G12/13/Rho GTPase. Références associées : PMID:32058960

• Le récepteur se localise sur la membrane cellulaire et présente les caractéristiques structurales classiques des GPCR, notamment sept domaines transmembranaires, des ponts disulfure et des sites de glycosylation.

Recommandations expérimentales et conseils techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 283–362 de la région intracellulaire C-terminale du GPR4 humain ; cette conception peut améliorer la spécificité envers le récepteur complet.
• Pour le western blot, il convient d’envisager des protocoles d’extraction des protéines membranaires ainsi que des conditions dénaturantes mais non réductrices afin de résoudre la bande prédite de 41 kDa.
• Pour l’ELISA, des formats direct ou de capture peuvent être évalués à l’aide de la protéine GPR4 recombinante ou de lysats cellulaires provenant de tissus humains ou de lignées cellulaires connues pour exprimer le récepteur.
• En tant qu’anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être vérifiée ; inclure des contrôles positifs appropriés (par exemple, des cellules surexprimant GPR4) et négatifs (par exemple, des lignées cellulaires dépourvues de GPR4 ou avec GPR4 invalidé).

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