Anticorps polyclonal anti-GPD2 pour WB, ELISA - P43304

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la GPD2

• GPD2 code pour la glycérol-3-phosphate déshydrogénase mitochondriale (mGDH), une flavoprotéine oxydoréductase qui catalyse l'oxydation du glycérol-3-phosphate en dihydroxyacétone phosphate, injectant des électrons dans la chaîne de transport d'électrons. C'est une enzyme sensible au calcium, cruciale pour la détection du glucose et la sécrétion d'insuline dans les cellules bêta pancréatiques.
• La protéine est un composant clé de la navette du glycérol phosphate, qui transfère les équivalents réducteurs du NADH cytosolique vers la chaîne respiratoire mitochondriale, reliant la glycolyse à la phosphorylation oxydative.
• La mGDH se localise sur la membrane mitochondriale interne et contient un peptide de transit pour le ciblage mitochondrial, ainsi qu'un domaine de liaison au dinucléotide adénine flavine (FAD) essentiel à l'activité enzymatique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, et la protéine se lie au calcium et à d'autres ions métalliques, qui modulent sa fonction catalytique.
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes ; l'isoforme canonique a un poids moléculaire calculé d'environ 81 kDa (80853 Da, UniProt P43304).
• En tant que membre de la famille des glycérol-3-phosphate déshydrogénases, GPD2 est centrale pour le métabolisme lipidique et l'homéostasie énergétique, avec des implications dans le diabète et les troubles métaboliques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 25–325 de la GPD2 humaine, couvrant une région en aval du peptide de transit mitochondrial. Cette conception peut reconnaître préférentiellement la forme mature et traitée de la protéine.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de GPD2 est d'environ 81 kDa. Envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de tissus pancréatiques, hépatiques ou musculaires, ou de lignées cellulaires pertinentes telles que INS-1 ou HepG2, où l'expression de la mGDH est attendue.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat est spécifiée ; une validation dans ces espèces est recommandée en comparant des échantillons tissulaires ou des contrôles de protéine recombinante pour confirmer une détection comparable.
• Dans les applications ELISA, titrez à la fois l'antigène de revêtement (protéine recombinante ou lysat tissulaire) et la concentration de l'anticorps primaire pour optimiser le rapport signal/bruit. Incluez des contrôles pour les effets de matrice.
• Comme l'activité de la GPD2 dépend du calcium, évitez les chélateurs de calcium dans les tampons de lyse ou d'essai, sauf si leur effet est caractérisé expérimentalement.

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