Anticorps polyclonal anti-GOT2 de lapin pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P00505

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la GOT2

• La GOT2, également connue sous le nom d'aspartate aminotransférase mitochondriale, de kynurénine aminotransférase 4 (KAT4) ou de protéine de liaison aux acides gras associée à la membrane plasmique (FABPpm), est codée par le gène GOT2 chez l'humain. Elle appartient à la famille des aminotransférases dépendantes du pyridoxal-phosphate de classe I.
• En tant qu'enzyme clé de la navette malate-aspartate, la GOT2 est essentielle pour maintenir l'équilibre redox intracellulaire du NAD(H) en facilitant le transfert d'équivalents réducteurs à travers la membrane mitochondriale.
• La GOT2 catalyse la transamination irréversible de la L-kynurénine en acide kynurénique (KA), un métabolite neuroactif, ce qui la relie à la modulation de la voie des kynurénines et aux processus neurologiques.
• L'enzyme joue également un rôle dans l'absorption cellulaire des acides gras à longue chaîne grâce à son identité de FABPpm au niveau de la membrane plasmique, contribuant ainsi au transport des lipides.
• La GOT2 est principalement localisée dans la matrice mitochondriale ; cependant, une fraction est également détectée au niveau de la membrane cellulaire, ce qui correspond à ses fonctions doubles dans le métabolisme mitochondrial et l'absorption des acides gras.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la méthylation, la nitration et la phosphorylation, qui peuvent réguler son activité et sa distribution subcellulaire. La protéine est synthétisée avec un peptide de transit mitochondrial qui est clivé pour donner la forme mature.
• Des mutations dans le gène GOT2 sont associées à l'encéphalopathie épileptique et du développement 82 (DEE82), soulignant son rôle critique dans le métabolisme cérébral.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux résidus 30–200 de la GOT2 humaine, une région qui comprend le segment N-terminal de la protéine mitochondriale mature après le clivage du peptide de transit. Cette conception peut favoriser la reconnaissance de la forme endogène traitée dans les mitochondries.
• Pour les applications de Western blot, envisagez d'enrichir les fractions mitochondriales pour améliorer le rapport signal/bruit, car la GOT2 est principalement mitochondriale. Le poids moléculaire prédit du précurseur est d'environ 47,5 kDa, tandis que la protéine mature migre près de 48 kDa.
• En immunohistochimie (IHC-P) et immunofluorescence (IF/ICC), validez la détection dans les tissus ou cellules à forte activité métabolique (par exemple, foie, cœur, cerveau) où l'expression de la GOT2 est abondante. Optimisez les étapes de perméabilisation et de démasquage antigénique pour assurer l'accès aux épitopes mitochondriaux.
• Pour l'ELISA, utilisez de la GOT2 recombinante ou des lysats tissulaires comme standard pour établir la sensibilité et la spécificité du test. Une réactivité croisée avec la GOT2 de souris et de rat a été observée, ce qui la rend adaptée aux modèles translationnels.

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