Anticorps Polyclonal Anti-GNRH1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P01148

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GNRH1

• La progonadolibérine-1 (GNRH1) est une protéine précurseur qui est traitée pour produire l'hormone 1 de libération des gonadotrophines (GnRH), un régulateur clé de l'axe reproductif.
• La GnRH stimule l'hypophyse antérieure à sécréter l'hormone lutéinisante (LH) et l'hormone folliculo-stimulante (FSH), qui sont essentielles à la fonction gonadique.
• La protéine est codée par le gène GNRH1, également appelé GNRH, GRH et LHRH, localisé sur le chromosome 8.
• Elle est synthétisée sous forme de préproprotéine avec un peptide signal (aa 1-23), et le décapeptide mature (aa 24-33) est libéré après clivage protéolytique.
• Au niveau subcellulaire, GNRH1 est dirigée vers la voie de sécrétion et est sécrétée par les neurones hypothalamiques.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'amidation de l'extrémité C-terminale, la formation d'acide pyroglutamique à l'extrémité N-terminale et le clivage au niveau des résidus basiques appariés.
• Le poids moléculaire du précurseur non traité est d'environ 10,38 kDa, mais le traitement génère des peptides actifs plus petits.
• Les mutations de GNRH1 sont associées à l'hypogonadisme hypogonadotrope et au syndrome de Kallmann, ce qui souligne son importance clinique.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé correspond aux acides aminés 24–92, qui inclut le décapeptide GnRH mature et les séquences flanquantes ; ainsi, l'anticorps peut reconnaître à la fois la forme précurseur et la forme traitée.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit du précurseur pleine longueur est d'environ 10 kDa ; utilisez un gel à haute concentration (par exemple 15 %) et optimisez les conditions de transfert pour retenir les petits peptides.
• La détection du peptide mature sécrété en WB peut nécessiter une concentration du surnageant de culture ou des protocoles d'extraction peptidique.
• En IF/ICC, GNRH1 est sécrétée ; envisagez d'utiliser des inhibiteurs de l'appareil de Golgi (par exemple la bréfeldine A) pour visualiser l'accumulation intracellulaire dans les cellules neuroendocrines.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; validez ses performances avec des standards de GnRH recombinante.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat suggère des épitopes conservés ; cependant, vérifiez toujours la spécificité pour l'espèce et le type de tissu concernés.

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