Anticorps polyclonal de lapin anti-GM130 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q08379

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du GM130

• GM130 (membre de la sous-famille A des golgines 2) est une protéine membranaire périphérique de la pile cis-Golgi, agissant comme un squelette membranaire qui maintient la structure de l'appareil de Golgi et facilite l'amarrage des vésicules (Probable) (PubMed:16489344). Références associées : PMID:16489344
• Conjointement avec p115/USO1 et STX5, il médie l'amarrage et la fusion des vésicules à la membrane cis-Golgi pour maintenir la structure empilée et interconnectée de l'appareil de Golgi.
• GM130 est essentiel pour la désassemblage mitotique de l'appareil de Golgi : la phosphorylation sur la Ser-37 par CDK1 au début de la mitose inhibe l'interaction avec p115, empêchant l'amarrage des vésicules COPI et stoppant le transport.
• Il joue un rôle clé dans l'assemblage des pôles du fuseau et l'organisation du centrosome (PubMed:26165940). GM130 favorise l'assemblage des pôles du fuseau en recrutant TPX2 sur les membranes de l'appareil de Golgi, ce qui active la kinase AURKA et stimule la nucléation locale des microtubules, reliant ainsi les membranes de l'appareil de Golgi au fuseau mitotique (PubMed:19242490, PubMed:26165940). Références associées : PMID:26165940 PMID:19242490
• Il régule également l'organisation du centrosome indépendamment de son rôle dans la structure de l'appareil de Golgi (PubMed:18045989, PubMed:19109421). Références associées : PMID:18045989 PMID:19109421
• GM130 est nécessaire pour la formation du ruban de Golgi et la glycosylation appropriée des protéines membranaires et sécrétoires (PubMed:16489344, PubMed:17314401). Références associées : PMID:16489344 PMID:17314401
• À l'échelle subcellulaire, GM130 se localise sur la membrane du réseau cis-Golgi, la membrane du compartiment intermédiaire entre le réticulum endoplasmique et l'appareil de Golgi, et la région du pôle du fuseau du cytosquelette.
• GM130 présente des domaines en hélice alpha super-enroulée (coiled-coil) et subit une phosphorylation et une méthylation ; des mutations dans GOLGA2 sont associées à une déficience intellectuelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 20-300 du GM130 humain) englobe la région N-terminale en hélice super-enroulée impliquée dans la liaison à p115 ; tenez-en compte lors de l'interprétation des profils de bandes ou de la reconnaissance potentielle d'isoformes en Western blot.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 113 kDa ; utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, 6–8 % SDS-PAGE) et des protocoles de transfert efficaces pour les protéines de poids moléculaire élevé.
• Dans les applications IHC-P et IF/ICC, optimisez les étapes de récupération de l'antigène et de perméabilisation pour assurer l'accessibilité à la cible localisée au cis-Golgi ; validez dans votre tissu ou système cellulaire spécifique.
• Lors de l'utilisation de l'ELISA, évaluez la pertinence de l'anticorps comme réactif de capture ou de détection ; la réactivité croisée avec le GM130 de souris et de rat peut être avantageuse pour les études multi-espèces.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre doit être vérifiée pour les dosages quantitatifs critiques, et des contrôles appropriés sont recommandés pour confirmer la spécificité.

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