Anticorps polyclonal Anti-Glypican 3 (GPC3) pour WB, FC, ELISA - P51654

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Glypicane-3

• La Glypicane-3 (GPC3) est un protéoglycane de surface cellulaire attaché à la membrane via une ancre glycosylphosphatidylinositol (GPI). Références associées : PMID:14610063
• Elle régule négativement la voie de signalisation Hedgehog en entrant en compétition avec le récepteur PTC1 pour les protéines Hedgehog, déclenchant l'endocytose et la dégradation lysosomale du complexe.
• GPC3 régule positivement la voie Wnt canonique en se liant aux récepteurs Frizzled et en améliorant leur interaction avec les ligands Wnt. Références associées : PMID:16227623, PMID:24496449
• Elle régule également positivement la signalisation Wnt non canonique et se lie au CD81, ce qui module la répression transcriptionnelle par HHEX.
• GPC3 inhibe l'activité dipeptidyl peptidase de la DPP4. Références associées : PMID:17549790
• La protéine joue un rôle essentiel dans le développement embryonnaire, y compris la formation des membres, le développement squelettique, la morphogenèse rénale par branchement, la formation vasculaire coronaire et la gastrulation.
• GPC3 contient des chaînes d'héparane sulfate et subit un épissage alternatif ; elle est classée comme une glycoprotéine avec des ponts disulfure et une modification par l'acide pyrrolidone carboxylique.
• L'expression tissulaire est la plus élevée dans le poumon, le foie et le rein, avec la protéine détectée dans le placenta. Références associées : PMID:32337544

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique situé dans la région C-terminale (aa 481–580), ce qui suggère que l'anticorps reconnaît principalement des épitopes linéaires, le rendant bien adapté à la détection par Western blot (WB) en conditions dénaturantes.
• En WB, une bande proche de 66 kDa est attendue pour GPC3 ; cependant, la glycosylation et d'autres modifications peuvent décaler le poids moléculaire apparent. Validez avec des contrôles positifs appropriés.
• Pour la cytométrie en flux (FC), assurez-vous de l'expression de surface de GPC3, car l'épitope peut être accessible sur les cellules intactes ; une perméabilisation peut être nécessaire pour la détection intracellulaire.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec la GPC3 de souris et de rat, permettant son utilisation dans des systèmes modèles rongeurs. Pensez à vérifier la réactivité dans votre contexte expérimental spécifique.
• Les performances en ELISA peuvent être optimisées en utilisant le peptide immunogène ou des fragments recombinants de GPC3 ; titrez la concentration d'anticorps pour obtenir le meilleur rapport signal/bruit.

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