Anticorps Monoclonal Anti-Glucose-6-Phosphate Isomérase (GPI) [Validé KD] pour WB, IF/ICC, ELISA - P06744

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Glucose-6-Phosphate Isomérase

• La glucose-6-phosphate isomérase (GPI) est également connue sous le nom de facteur de motilité autocrine (AMF), neuroleukine (NLK), phosphoglucose isomérase (PGI), phosphohexose isomérase (PHI) et antigène spermatique 36 (SA-36).
• L'enzyme catalyse la conversion de l'alpha-D-glucose-6-phosphate en bêta-D-fructose-6-phosphate, la deuxième étape de la glycolyse, et la réaction inverse dans la néoglucogenèse, dans le cytoplasme. Références associées : PMID:28803808
• La GPI présente également une activité C2-épimérase, interconvertissant le D-glucose-6-phosphate et le D-mannose-6-phosphate, et une activité anomérase pour plusieurs hexose-6-phosphates.
• Outre son rôle métabolique, la GPI extracellulaire fonctionne comme une cytokine : en tant que facteur de motilité autocrine (AMF), un facteur angiogénique sécrété améliorant la motilité des cellules endothéliales. Références associées : PMID:11437381
• Elle agit également comme une neuroleukine, un facteur neurotrophique soutenant la survie des neurones spinaux et sensoriels, et est libérée par les cellules T stimulées par la lectine pour induire la sécrétion d'immunoglobulines. Références associées : PMID:11004567 PMID:3352745
• Au niveau subcellulaire, la GPI se trouve dans le cytoplasme et est sécrétée.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, l'hydroxylation, la phosphorylation et la conjugaison à l'ubiquitine ; l'épissage alternatif produit plusieurs isoformes.
• Les mutations de la GPI sont associées à l'anémie hémolytique héréditaire.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'anticorps a été généré en utilisant un immunogène recombinant englobant les acides aminés 1-280 de la GPI humaine (NP_000166.2), ce qui peut cibler des épitopes conservés ; la réactivité croisée avec la souris et le rat est confirmée.
• Pour le transfert Western (Western blotting, WB), une bande autour de 63 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser des conditions réductrices et des témoins positifs appropriés tels que des lysats cellulaires humains, de souris ou de rat.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), notez que la GPI est cytoplasmique et sécrétée ; la fixation et la perméabilisation peuvent être nécessaires pour la détection intracellulaire, et envisagez une co-coloration avec des marqueurs d'organites.
• Pour ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; validez avec la protéine GPI recombinante ou des échantillons biologiques pour établir la linéarité et la sensibilité.
• En tant qu'anticorps monoclonal, une cohérence d'un lot à l'autre est attendue, mais optimisez toujours les dilutions de travail pour votre dosage et votre type d'échantillon spécifiques.
• L'anticorps est étiqueté comme validé KD ; envisagez d'inclure des témoins de knockdown appropriés dans vos expériences pour confirmer la spécificité.

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