Anticorps polyclonal de lapin anti-GIF/Facteur intrinsèque pour WB, IF/ICC, ELISA - P27352

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du GIF (Facteur intrinsèque)

• Le gène GIF code pour le facteur intrinsèque liant la cobalamine, également appelé facteur intrinsèque gastrique (IF) ou INF. C'est une glycoprotéine sécrétée d'un poids moléculaire d'environ 45 kDa (UniProt : 45 416 Da).
• Sa fonction principale est de favoriser l'absorption de la vitamine B12 (cobalamine) dans l'iléum : il forme un complexe avec la cobalamine et interagit avec le récepteur cubiline (CUBN) pour l'endocytose médiée par récepteur.
• Son expression est très spécifique de la muqueuse gastrique, où il est sécrété par les cellules pariétales.
• La protéine comporte des caractéristiques comme un peptide signal, des ponts disulfures et des sites de glycosylation, et elle est soumise à un épissage alternatif et à une phosphorylation (mots-clés UniProt).
• Elle appartient à la famille des protéines de transport de la cobalamine et est impliquée dans le transport des ions cobalt. Les mutations du gène GIF sont associées à la déficience congénitale en facteur intrinsèque, une forme rare d'anémie mégaloblastique.
• Des études structurales tridimensionnelles ont été publiées (mot-clé UniProt : structure 3D).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 20 à 300 du GIF humain, couvrant la région N-terminale incluant le site de clivage du peptide signal et le domaine de liaison à la cobalamine. Cette région est relativement conservée, ce qui explique la réactivité croisée avec la souris (indiquée ci-dessus).
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 45 kDa est attendue dans les lysats de tissu gastrique ou les lignées cellulaires exprimant GIF. Validez l'anticorps dans votre système d'échantillon approprié, car la sécrétion peut entraîner de faibles concentrations intracellulaires.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), prévoyez une perméabilisation pour détecter les pools de protéines intracellulaires pendant la synthèse. Pour la détection de protéines sécrétées, l'ajout d'un inhibiteur de la sécrétion (par exemple la bréfeldine A) peut améliorer le signal.
• En ELISA, cet anticorps polyclonal peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; cependant, le couplage avec un anticorps monoclonal peut améliorer la spécificité dans les formats ELISA sandwich.
• Incluez systématiquement des contrôles positifs (extrait de muqueuse gastrique) et négatifs (tissu n'exprimant pas la cible) appropriés, et validez les performances de l'anticorps dans votre contexte expérimental.

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