Anticorps polyclonal de lapin anti-GIF pour WB, ELISA - P27352

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du GIF

• La protéine codée par le gène CBLIF (GIF) est le facteur intrinsèque gastrique (IF), également appelé facteur intrinsèque de liaison à la cobalamine, essentiel à l’absorption de la vitamine B12 (cobalamine).
• Le GIF est une glycoprotéine sécrétée par les cellules de la muqueuse gastrique, principalement les cellules pariétales, et produite sous forme de précurseur avec un peptide signal.
• Sur le plan fonctionnel, le GIF se lie à la cobalamine libre dans l’estomac ; après clivage protéolytique dans le duodénum, le complexe stable GIF-cobalamine interagit avec le récepteur cubiline (CUBN) dans l’iléon, facilitant l’endocytose médiée par le récepteur pour l’absorption de la vitamine B12.
• Le gène GIF subit un épissage alternatif, générant plusieurs isoformes ; les variants associés à des maladies dans CBLIF provoquent une déficience en facteur intrinsèque (IFD), entraînant une anémie pernicieuse due à une absorption altérée de la B12.
• Le GIF est une phosphoprotéine comportant plusieurs ponts disulfure essentiels à sa structure et à sa fonction, et appartient à un groupe de protéines impliquées dans le transport du cobalt et des ions.
• L’expression tissulaire est hautement spécifique de la muqueuse gastrique, ce qui est cohérent avec son rôle dans l’absorption gastro-intestinale des vitamines.
• Les mots-clés associés à cette protéine comprennent variant pathologique, glycoprotéine, sécrétée, signal et transport, soulignant son importance clinique et fonctionnelle.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène utilisé est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 19 à 417 du GIF humain, correspondant à la protéine mature dépourvue du peptide signal, ce qui suggère que l’anticorps peut reconnaître la forme endogène sécrétée.
• Pour le Western blot, envisagez de comparer les conditions de SDS-PAGE réductrices et non réductrices, car le GIF contient plusieurs ponts disulfure susceptibles d’influencer la mobilité électrophorétique.
• Compte tenu de l’expression spécifique dans la muqueuse gastrique, validez l’anticorps sur des lysats d’estomac humains, de souris ou de rats, et envisagez d’utiliser un tissu négatif, tel que le foie, comme contrôle de spécificité.
• En ELISA, cet anticorps polyclonal peut être étudié comme réactif de capture ou de détection ; pour un ELISA sandwich, il est recommandé de l’associer à un anticorps monoclonal anti-GIF afin d’améliorer la spécificité.
• Comme le GIF est une protéine sécrétée, lors de l’analyse de surnageants de cultures cellulaires ou tissulaires, des étapes de concentration peuvent être nécessaires pour détecter les niveaux endogènes par WB ou ELISA.
• Étant donné qu’une réactivité croisée est rapportée chez la souris et le rat, vérifiez la conservation des épitopes et les performances du test chez ces espèces à l’aide de contrôles positifs appropriés.

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