Anticorps polyclonal de lapin anti-GFRA3 pour WB et ELISA - O60609

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du GFRA3

• Le GFRA3 (récepteur alpha-3 de la famille GDNF) est un récepteur de surface cellulaire ancré par glycosylphosphatidylinositol (GPI) qui appartient à la famille des récepteurs du GDNF.
• Il fonctionne comme un récepteur à haute affinité pour l'artémine (ARTN), un facteur neurotrophique qui soutient la survie des neurones sensoriels et sympathiques périphériques. Références associées : PMID:31535977 PMID:9883723
• Lors de la liaison de l'artémine, le GFRA3 forme un complexe avec le récepteur tyrosine kinase RET, conduisant à l'autophosphorylation et à l'activation des voies de signalisation en aval médiées par RET.
• Le récepteur est ancré à la feuille externe de la membrane cellulaire via une liaison GPI et contient un peptide signal, plusieurs liaisons disulfure et des sites de glycosylation N-liés.
• Le GFRA3 est largement exprimé dans les tissus adultes et fœtaux, avec des niveaux particulièrement élevés dans le système nerveux périphérique (ganglions sensoriels et sympathiques), l'estomac et l'appendice ; son expression est absente du système nerveux central.
• L'épissage alternatif du gène GFRA3 peut donner lieu à de multiples isoformes, et la protéine est sujette à un clivage protéolytique depuis la membrane.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 32–240 du GFRA3 humain, ce qui englobe le domaine extracellulaire de liaison au ligand ; cette conception favorise la détection des formes liées à la membrane ou clivées.
• Pour le Western blot, utilisez des tampons de lyse appropriés contenant des détergents et des inhibiteurs de protéases ; le poids moléculaire prédit est d'environ 45 kDa, mais la glycosylation peut provoquer un décalage vers des masses apparentes plus élevées.
• En ELISA, envisagez de revêtir avec le domaine extracellulaire recombinant du GFRA3 ou de l'artémine pour capturer l'anticorps ; confirmez la réactivité contre la protéine native dans des matrices biologiques.
• Étant donné la nature polyclonale, une réactivité croisée potentielle avec d'autres récepteurs de la famille GDNF (par exemple, GFRA1, GFRA2) doit être évaluée à l'aide de témoins knockout ou de peptides de blocage.
• La réactivité croisée signalée avec le GFRA3 murin permet des études comparatives entre espèces ; validez les performances dans le type d'échantillon pertinent avant de faire des comparaisons quantitatives.

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