Anticorps monoclonal anti-GFAP pour WB, IF, IHC-P, ELISA - P14136

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la GFAP

• La GFAP (protéine acide fibrillaire gliale) est une protéine de filament intermédiaire de classe III et un marqueur bien établi des astrocytes dans le système nerveux central.
• Elle joue un rôle crucial dans la distinction des astrocytes des autres cellules gliales lors du développement du SNC (UniProt).
• La protéine se localise principalement dans le cytoplasme, formant des réseaux filamenteux.
• La GFAP présente une expression tissulaire spécifique dans les cellules dépourvues de fibronectine, ce qui est cohérent avec sa spécificité pour les cellules gliales.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la citrullination, la méthylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler la dynamique et la fonction des filaments.
• Le gène GFAP subit un épissage alternatif, donnant naissance à de multiples isoformes avec une diversité fonctionnelle potentielle.
• Des mutations dans la GFAP sont associées à la maladie d'Alexander, une leucodystrophie, soulignant son importance dans l'intégrité des astrocytes.
• Les mots-clés d'UniProt incluent : structure 3D, enroulement en hélice, séquençage protéique direct, identification par protéomique, protéome de référence.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps correspond aux acides aminés 60-383 de la GFAP humaine, couvrant une grande région interne de la protéine. Cette conception peut permettre la reconnaissance de multiples isoformes de la GFAP et une réactivité inter-espèces, comme validé pour la souris et le rat.
• Pour le transfert Western (WB), la bande observée est attendue autour de 50 kDa (poids moléculaire théorique ~49.9 kDa). Envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux provenant de tissu cérébral ou d'astrocytes en culture.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC, IF-P) et l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour préserver la structure des filaments intermédiaires. La coloration de la GFAP devrait produire un motif cytoplasmique filamenteux typique dans les astrocytes.
• Dans les applications ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; l'appariement avec un anticorps apparié approprié peut améliorer la sensibilité.
• Étant donné la nature monoclonale, une cohérence d'un lot à l'autre est attendue, mais une validation dans le cadre expérimental spécifique est conseillée.

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