Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-GCN2 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9P2K8

Spécifications et Paramètres Essentiels du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de GCN2

• GCN2, codé par EIF2AK4, est une sérine/thréonine-protéine kinase détectant le stress métabolique qui phosphoryle eIF-2-alpha en réponse à une faible disponibilité en acides aminés, activant la réponse intégrée au stress (ISR). Références associées : PMID:25329545 PMID:32610081
• La phosphorylation d'eIF-2-alpha le convertit en un inhibiteur global de la traduction, atténuant la synthèse protéique dépendante de la coiffe tout en permettant la traduction sélective d'ARNm spécifiques à l'ISR comme ATF4, reprogrammant ainsi l'expression des gènes de biosynthèse des acides aminés. Références associées : PMID:32610081
• La protéine est impliquée dans la régulation du cycle cellulaire en favorisant la répression traductionnelle de l'ARNm de la cycline D1 lors de l'activation de l'UPR ou l'activation traductionnelle de CDKN1A/p21 sous privation d'acides aminés. Références associées : PMID:26102367
• GCN2 contient un domaine de liaison à l'ATP, un domaine kinase et un domaine de liaison à l'ARNt, lui permettant de détecter directement les ARNt non chargés et de lier l'état nutritionnel au contrôle traductionnel.
• Elle se localise principalement dans le cytoplasme et est largement exprimée, avec une présence notable dans les poumons, les cellules musculaires lisses et les macrophages.
• La kinase joue un rôle pro-survie et pro-apoptotique selon le contexte de stress, et est également impliquée dans la défense antivirale, favorisant l'autophagie et la présentation d'antigènes pendant l'infection par le virus de la fièvre jaune. Références associées : PMID:24310610
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes, et la protéine est soumise à des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation et la phosphorylation, qui régulent son activité.
• Au-delà de la détection des nutriments, GCN2 contribue à la plasticité synaptique, à l'apprentissage, à la formation de la mémoire à long terme et à l'inhibition de la croissance des neurites dans des contextes neuronaux.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• Pour le WB, envisagez d'utiliser un gel SDS-PAGE à faible pourcentage (par ex. 6–8%) pour résoudre la protéine GCN2 de haut poids moléculaire (~187 kDa) et optimisez les conditions de transfert pour les grosses protéines.
• En IF/ICC, attendez-vous à une coloration principalement cytoplasmique ; validez la localisation sous-cellulaire avec des marqueurs d'organites dans votre système cellulaire d'intérêt.
• L'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1–300) ; vérifiez la spécificité dans l'espèce concernée (humain, souris, rat) en utilisant des contrôles positifs et négatifs.
• Associez à des contrôles de charge appropriés et envisagez d'utiliser des inhibiteurs de protéases/phosphatases pendant la lyse en raison de modifications post-traductionnelles potentielles affectant la migration protéique.

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