Anticorps polyclonal de lapin anti-GCN1L1 (GCN1) pour WB et ELISA - Q92616

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de GCN1L1 (GCN1)

• GCN1L1, également appelé GCN1, protéine 1 similaire à GCN1 ou activateur traductionnel GCN1, est une grande protéine d’environ 293 kDa qui agit comme capteur des ribosomes bloqués.
• Il se lie directement aux ribosomes et agit comme sentinelle des ribosomes entrant en collision. Lorsqu’un ribosome est bloqué, GCN1 favorise le recrutement de la ligase E3 de l’ubiquitine RNF14, qui ubiquitine EEF1A1/eEF1A ainsi que d’autres facteurs de traduction, les ciblant pour leur dégradation. Références associées : PMID:32610081, PMID:36638793, PMID:37651229, PMID:37951215, PMID:37951216
• GCN1 intervient également dans la dégradation d’ETF1/eRF1 et l’ubiquitination des protéines ribosomiques via la voie RNF14-RNF25, assurant l’élimination des complexes de traduction bloqués. Références associées : PMID:36638793, PMID:37651229
• En tant qu’activateur positif de la réponse intégrée au stress (ISR), GCN1 interagit avec la kinase EIF2AK4/GCN2 sur les ribosomes en cours de traduction, stimulant son activité. Cela entraîne la phosphorylation de l’eIF-2-alpha et une atténuation globale de la traduction, tout en permettant la traduction sélective d’ARNm répondant au stress, tels que ATF4.
• GCN1 est principalement localisé dans le cytoplasme, où il surveille les ribosomes en cours de traduction.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire, avec une expression notable dans le muscle squelettique, l’ovaire et le testicule. Références associées : PMID:9039502, PMID:9234705
• La protéine subit une acétylation et une phosphorylation, et comporte des domaines et répétitions en coiled-coil, ce qui correspond à son rôle important d’échafaudage.
• Les mots-clés d’UniProt incluent également Réponse au stress, Régulation de la traduction et Activateur, soulignant son rôle central dans la protéostasie cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène correspond à une région C-terminale (aa 2462–2671), ce qui peut conférer une spécificité pour GCN1L1 complet. Envisagez de vérifier la réactivité de l’anticorps à l’aide de lysats de lignées cellulaires humaines dont l’expression de GCN1L1 est connue.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d’environ 293 kDa ; utilisez un pourcentage de gel et des conditions de transfert adaptés aux protéines de haut poids moléculaire.
• L’ELISA peut être utilisé pour détecter et quantifier GCN1L1 dans des échantillons humains ; envisagez de l’associer à un anticorps de détection apparié pour un ELISA sandwich.
• GCN1L1 étant exprimé de manière ubiquitaire, il peut servir de contrôle de chargement pour les protéines de haut poids moléculaire ; toutefois, validez la stabilité de son expression dans les différentes conditions expérimentales.
• La réactivité croisée est rapportée uniquement chez l’humain ; pour les autres espèces, effectuez un alignement de séquences afin d’évaluer la réactivité potentielle.
• L’expédition dans des sacs de glace suggère que l’anticorps est stable dans le respect de la chaîne du froid ; conservez-le à la température recommandée dès sa réception.

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