Anticorps polyclonal de lapin anti-GBF1 pour WB, ELISA - Q92538

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GBF1

• GBF1 (facteur d'échange de nucléotides guanine spécifique de l'appareil de Golgi résistant à la bréfeldine A) est une protéine de 206 kDa codée par le gène GBF1 (Identifiant du gène : 8729). Elle appartient à la famille des facteurs d'échange de nucléotides guanine (GEF) pour les petites GTPases Arf.
• Fonctionne comme un GEF pour ARF1, ARF4 et ARF5, catalysant l'échange GDP/GTP pour activer les protéines Arf, ce qui initie l'enrobage des vésicules COPI dans les compartiments sécrétoires précoces. Références associées : PMID:12047556, PMID:12808027, PMID:15616190
• Recruté sur les membranes du cis-Golgi de manière dépendante d'Arf-GDP et est essentiel pour le recrutement du manteau COPI aux sites de sortie du RE (ERES), à l'ERGIC et aux compartiments du cis-Golgi, médiant le transport rétrograde vers le RE. Références associées : PMID:12047556, PMID:12808027, PMID:16926190
• Impliqué dans le recrutement des adaptateurs de clathrine (GGA1-3, BIG1/2, AP-1) au niveau du réseau trans-Golgi via son activité GEF sur ARF4/ARF5, facilitant le transport dépendant de la clathrine. Références associées : PMID:23386609
• Nécessaire à l'assemblage et au maintien de l'appareil de Golgi ; la phosphorylation par l'AMPK déclenche le désassemblage du Golgi pendant la mitose et le stress. Références associées : PMID:12808027, PMID:18003980, PMID:18063581, PMID:23418352
• Localisé subcellulairement à l'appareil de Golgi (cis- et trans-Golgi), à l'ERGIC, au cytoplasme, aux gouttelettes lipidiques et à la membrane.
• Exprimé de manière ubiquitaire et lié à la maladie de Charcot-Marie-Tooth de type 2GG (CMT2GG) lorsqu'il est muté.
• Peut participer à la chimiotaxie médiée par les récepteurs couplés aux protéines G (GPCR) et à la production de superoxyde dans les neutrophiles en recrutant ARF1 et le complexe NADPH oxydase au bord d'attaque. Références associées : PMID:22573891
• Joue un rôle dans le maintien de la morphologie mitochondriale. Références associées : PMID:25190516

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1-85) du GBF1 humain, ce qui suggère que l'anticorps peut reconnaître des épitopes dans ce domaine.
• Pour le Western blot, utilisez un gel à haut poids moléculaire (par exemple, SDS-PAGE 8%) et optimisez les conditions de transfert pour la grande protéine de 206 kDa.
• Validez la spécificité de l'anticorps dans des lysats de cellules/tissus humains et murins pertinents ; envisagez d'utiliser des contrôles de knockdown par siRNA ou de surexpression.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection ; effectuez une titration pour déterminer la concentration de travail optimale.

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