Anti-GATA3 Rabbit PolymAb® pour WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ChIP, ELISA - P23772

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GATA3

• GATA3 (facteur de liaison GATA 3) est un activateur transcriptionnel qui se lie à l'amplificateur des gènes du récepteur des cellules T alpha et delta, reconnaissant la séquence consensus 5'-AGATAG-3' ; il est nécessaire pour la différenciation des lymphocytes T auxiliaires 2 (Th2) lors des réponses immunitaires et inflammatoires.
• Règle positivement l'expression d'ASB2, établissant un lien avec les voies de dégradation des protéines. Références connexes : PMID:31175139
• Coordonne l'activation transcriptionnelle des macrophages et le reprogrammation métabolique dépendante de l'UCP2 en réponse à l'IL33, favorisant la différenciation des macrophages activés alternativement résolvant l'inflammation lors d'une lésion tissulaire.
• Se localise dans le noyau, ce qui est cohérent avec sa fonction de facteur de transcription liant l'ADN.
• Présente une expression spécifique aux cellules T, critique pour le développement et les fonctions effectrices des cellules T.
• Contient deux domaines de type doigt de zinc C4 qui médient la liaison à l'ADN et la régulation transcriptionnelle.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, modulant son activité régulatrice.
• Classé comme activateur liant l'ADN impliqué dans l'immunité, l'immunité innée et la régulation de la transcription ; membre de la famille des protéines à doigts de zinc GATA.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 135-258 de GATA3 de souris, incluant le domaine de liaison à l'ADN du doigt de zinc ; cette région est hautement conservée et l'anticorps est susceptible de reconnaître la protéine native dans de multiples applications.
• Pour le transfert Western (Western blot), attendez-vous à une bande près de 48 kDa ; envisagez d'utiliser des extraits nucléaires comme témoin positif et validez avec des lysats de cellules T appropriés.
• Dans l'immunoprécipitation de chromatine (ChIP), vérifiez l'efficacité de liaison par PCR quantitative sur des locus cibles connus de GATA3, et optimisez les conditions de réticulation pour votre type cellulaire.
• Pour l'immunofluorescence et l'immunohistochimie, anticipez un marquage nucléaire ; incluez toujours un témoin sans anticorps primaire et confirmez la spécificité en utilisant des modèles Gata3-knockout ou des échantillons traités avec siARN.
• Titrez l'anticorps pour chaque application et validez-le dans le système biologique pertinent (humain, souris ou rat) pour établir les dilutions de travail optimales.

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