Anticorps monoclonal de lapin anti-GATA3 pour WB, IF, FC - P23771

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GATA-3

• GATA3 (GATA-binding factor 3) est un membre de la famille GATA des facteurs de transcription à doigt de zinc qui se lie à la séquence d'ADN consensus 5'-AGATAG-3' dans les régions régulatrices des gènes cibles.
• Il fonctionne comme un activateur transcriptionnel essentiel pour l'expression des gènes du récepteur des cellules T α et δ, et est indispensable à la différenciation des cellules T-helper 2 (Th2), stimulant les réponses immunitaires et inflammatoires.
• GATA3 régule à la hausse l'expression d'ASB2 par similarité et coordonne l'activation transcriptionnelle des macrophages dépendante d'IL33 et la reprogrammation métabolique médiée par UCP2, favorisant l'activation alternative des macrophages lors de lésions tissulaires.
• La protéine se localise exclusivement dans le noyau, conformément à son rôle de facteur de transcription.
• Elle est principalement exprimée dans les lymphocytes T et les cellules endothéliales, et les mutations de GATA3 provoquent un hypoparathyroïdie, une surdité neurosensorielle et une maladie rénale (syndrome HDR) – reflété dans les alias HDR/HDRS.
• GATA3 subit une phosphorylation post-traductionnelle et contient deux domaines à doigt de zinc de type C2H2 qui assurent la liaison à l'ADN.
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes, et la protéine fait l'objet d'identifications protéomiques dans diverses études.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 1–200 de la GATA3 humaine, une région N-terminale qui inclut des domaines régulateurs ; par conséquent, l'anticorps peut reconnaître de multiples isoformes et états de phosphorylation. Confirmez par western blot en utilisant des lysats de cellules exprimant GATA3.
• Pour le western blot, une bande d'environ 48 kDa est attendue ; utilisez un contrôle de charge approprié et validez la spécificité du signal via l'inactivation par siRNA ou des lignées cellulaires knockout.
• En immunofluorescence/immunocytochimie et en cytométrie en flux (intracellulaire), une coloration nucléaire doit être observée. Perméabilisez les cellules de manière appropriée et incluez des contrôles isotypiques.
• L'anticorps est spécifique à la GATA3 humaine ; la réactivité croisée avec la souris ou le rat n'a pas été déterminée. Validez dans des systèmes modèles pertinents si une utilisation inter-espèces est prévue.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé dans des formats sandwich ou directs ; optimisez les conditions de revêtement et de détection.

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