Anticorps polyclonal anti-GATA3 pour WB et ELISA - P23771

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GATA3

• GATA3 (facteur de liaison GATA 3) est un facteur de transcription à doigt de zinc appartenant à la famille GATA, caractérisé par deux motifs de doigt de zinc de type C4 qui médient la liaison à l'ADN sur la séquence consensus 5'-AGATAG-3'.
• Il agit comme un activateur transcriptionnel essentiel pour l'expression des gènes alpha et delta du récepteur des lymphocytes T et est indispensable à la différenciation des lymphocytes T auxiliaires de type 2 (Th2) lors des réponses immunitaires et inflammatoires.
• GATA3 régule positivement l'expression d'ASB2 (par similarité) et coordonne l'activation transcriptionnelle des macrophages induite par l'IL33, y compris la reprogrammation métabolique dépendante de l'UCP2 vers un phénotype anti-inflammatoire.
• En réponse à une lésion tissulaire, GATA3 agit en aval de la signalisation de l'IL33 pour promouvoir la différenciation des macrophages alternativement activés, contribuant à la résolution de l'inflammation.
• La protéine se localise dans le noyau, conformément à son rôle de facteur de transcription, et est exprimée principalement dans les lymphocytes T et les cellules endothéliales.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes ; l'isoforme canonique a un poids moléculaire d'environ 48 kDa (calculé à partir d'Uniprot : 47916 Da).
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, et des mutations de GATA3 sont associées à la surdité et à d'autres maladies (syndrome HDR).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend les 260 acides aminés N-terminaux de GATA3 humain, une région contenant des domaines de transactivation et une partie du premier doigt de zinc. Cette conception peut favoriser la détection des isoformes pleine longueur et de certaines isoformes tronquées.
• Pour le Western blot, des extraits nucléaires ou des lysats cellulaires totaux provenant de lignées de lymphocytes T ou de macrophages stimulés par l'IL33 sont recommandés ; une bande proche de 48 kDa est attendue.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec GATA3 de souris, permettant son utilisation dans des modèles murins, mais une validation dans le système d'échantillon spécifique (par ex., type de tissu, conditions de stimulation) est conseillée.
• Dans les applications ELISA, envisagez d'utiliser une protéine GATA3 recombinante ou des fragments peptidiques comme standards de capture, et optimisez le blocage pour réduire le bruit de fond dû aux protéines nucléaires.
• En raison de sa nature polyclonale, la cohérence entre les lots doit être surveillée, et les expériences critiques peuvent bénéficier de l'inclusion d'un lysat témoin avec knockdown ou knockout.

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