Anticorps monoclonal lapin anti-G3BP1 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13283

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de G3BP1

• La protéine de liaison à la protéine activant la GTPase Ras 1 (G3BP1), également désignée ADN hélicase VIII dépendante de l'ATP (hDH VIII) et protéine de liaison au domaine SH3 de GAP 1, est une protéine multifonctionnelle impliquée dans la dynamique des granules de stress, le métabolisme de l'ARN et l'immunité innée.
• G3BP1 est un nucléateur essentiel des granules de stress, des organelles sans membrane qui séquestrent les ARNm et les complexes de traduction bloqués en conditions de stress. Il induit la séparation de phase liquide-liquide (SPLL) lors de la liaison à l'ARN non plié, agissant comme un interrupteur moléculaire qui détecte les niveaux d'ARN libre pour déclencher la condensation.
  Références associées :
  PMID:37672657 PMID:20180778 PMID:23279204 PMID:32302570 PMID:32302571 PMID:32302572
• Il présente une activité hélicase dépendante de l'ATP et du magnésium, déroulant les duplex ADN/ADN, ARN/ADN et ARN/ARN avec une directionnalité 5'→3', préférant les duplex partiels avec une région hybridée de 17 pb et des extrémités 3' surdépassantes.
  Références associées :
  PMID:9889278
• Il améliore la signalisation immunitaire innée en favorisant la voie cGAS-STING de détection de l'ADN et la voie RIG-I de détection de l'ARN. Il facilite la liaison à l'ADN et la condensation de cGAS, et stimule la production d'interférons de type I médiée par RIG-I.
  Références associées :
  PMID:30510222 PMID:30804210 PMID:34779554
• Il possède une activité endoribonucléase dépendante de la phosphorylation in vitro, clivant entre la cytosine et l'adénine avec une préférence pour la région 3'-UTR de l'ARNm de MYC.
  Références associées :
  PMID:11604510
• Il se localise dans le cytoplasme, le cytosol, le péricaryon, le noyau et principalement dans les granules de stress lors d'un stress cellulaire.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire dans tous les tissus et soumis à de multiples modifications post-traductionnelles : acétylation, méthylation, phosphorylation et conjugaison à des protéines ubiquitine-like, qui peuvent réguler sa fonction et sa localisation.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 350 à 450 de la G3BP1 humaine (Q13283), une région du domaine C-terminal. Cette séquence est très conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui confirme la réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blot (WB), une bande spécifique d'environ 52 kDa est attendue. Optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps en fonction de votre type d'échantillon.
• En immunofluorescence (IF/ICC), G3BP1 présente une coloration cytoplasmique diffuse en conditions basales ; l'induction des granules de stress (par exemple par traitement à l'arsénite) peut être nécessaire pour observer une localisation ponctuelle distincte.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), confirmez l'efficacité de capture dans vos conditions de lyse et de lavage, car les interactions de G3BP1 avec l'ARN et d'autres protéines peuvent influencer le rendement.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; validez son appariement avec un anticorps secondaire ou un antigène compatible.
• Validez systématiquement les performances de l'anticorps dans le système d'échantillon et l'application concernés, car les conditions expérimentales peuvent affecter les résultats.

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