Anticorps monoclonal anti-furine pour WB et ELISA - P09958

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la furine

• La furine (PCSK3) est une sérine endoprotéase dépendante du calcium appartenant à la famille des proprotéines convertases, également connue sous le nom d'enzyme de clivage des résidus d'acides aminés basiques appariés (PACE) et d'enzyme de traitement dibasique.
• La furine reconnaît et clive les précurseurs polypeptidiques au niveau de la séquence consensus RX(K/R)R, jouant un rôle essentiel dans la maturation des proprotéines au sein de la voie sécrétoire constitutive. Références associées : PMID:11799113, PMID:1629222, PMID:1713771
• Elle traite des protéines clés telles que le facteur de croissance transformant bêta-1 (TGFB1) et la prohormone du facteur natriurétique cérébral, les convertissant en leurs formes actives. Références associées : PMID:7737999, PMID:20489134, PMID:21763278
• La furine circule entre le réseau trans-Golgi, la surface cellulaire et les endosomes, et est également sécrétée sous une forme soluble.
• La protéine subit un clivage autocatalytique pour générer l'enzyme active, et contient des ponts disulfures, ainsi que des sites de glycosylation et de phosphorylation qui régulent sa fonction.
• La furine est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, reflétant son rôle central dans le traitement d'un large éventail de protéines sécrétées et membranaires.
• La furine est exploitée par de nombreux agents pathogènes pour activer leurs protéines de surface, notamment la gp160 du VIH-1, l'hémagglutinine de la grippe et la protéine Spike du SARS-CoV-2, ce qui en fait une cible pour la recherche antivirale.
• En traitant la sous-unité accessoire ATP6AP1 de la V-ATPase, la furine régule indirectement l'acidification des granules sécrétoires dans les cellules des îlots pancréatiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu des acides aminés 200–300 ; l'anticorps reconnaît probablement un épitope linéaire, ce qui le rend adapté aux applications dénaturantes telles que le Western blot. Pour les applications natives comme l'ELISA, valider la liaison dans des conditions non dénaturantes.
• En Western blot, attendez-vous à une bande autour de 87 kDa pour la furine pleine longueur. En raison du traitement des proprotéines, des bandes supplémentaires correspondant à la proforme et aux formes clivées matures peuvent également apparaître.
• L'expression ubiquitaire permet à de nombreuses lignées cellulaires de servir de contrôles positifs ; envisagez les cellules HeLa, HEK293 ou A549. Une réactivité croisée avec la souris est indiquée, mais vérifiez l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène lors du test sur d'autres espèces.
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et les titres d'anticorps, car l'immunogène peptidique peut influencer la reconnaissance de la protéine native.

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