Anticorps polyclonal de lapin anti-FTO pour WB, IP, ELISA - Q9C0B1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de FTO

• FTO (protéine associée à la masse graisseuse et à l'obésité) est une dioxygénase dépendante de l'alpha-kétoglutarate qui agit comme une ARN déméthylase, catalysant la déméthylation oxydative de la N6-méthyladénosine (m6A) dans l'ARNm, l'ARNsn U6 et la modification m6A(m) de la coiffe 5'. Références associées : PMID:22002720, PMID:25452335, PMID:26457839, PMID:30197295, PMID:28002401
• Elle déméthyle également la N1-méthyladénine dans les ARNt et peut réparer l'ADN/ARN alkylé in vitro, bien que la pertinence in vivo reste incertaine. Références associées : PMID:30197295, PMID:18775698, PMID:20376003
• En modulant les niveaux de m6A, FTO régule la stabilité, l'épissage et la traduction des ARNm, influençant ainsi l'adipogenèse, le poids corporel et l'homéostasie énergétique. Références associées : PMID:18775698, PMID:26287746
• FTO est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux les plus élevés dans les glandes surrénales et le cerveau (notamment l'hypothalamus et l'hypophyse), et est surexprimée dans certaines leucémies myéloïdes aiguës (LMA) avec des réarrangements génétiques spécifiques. Références associées : PMID:17434869, PMID:17496892, PMID:28017614
• La localisation subcellulaire inclut le noyau (avec un enrichissement dans les speckles nucléaires) et le cytoplasme, ce qui reflète ses rôles dans le traitement de l'ARN et la traduction.
• FTO appartient à la famille des dioxygénases ALKBH et contient un domaine de liaison au fer et au 2-oxoglutarate essentiel à son activité catalytique.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et la conjugaison de type ubiquitine, qui peuvent réguler sa stabilité et son activité.
• FTO agit comme un oncogène dans la LMA en déméthylant et stabilisant les ARNm de facteurs leucémogènes tels que MYC et CEBPA. Références associées : PMID:28017614, PMID:29249359

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 327 à 504 (région C-terminale) de la FTO humaine. Cet anticorps polyclonal est censé reconnaître plusieurs épitopes, offrant une détection robuste dans des conditions dénaturantes et natives.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 58 kDa ; validez l'expression dans des lysats de contrôle positif (par exemple, cerveau, lignées cellulaires de LMA) et envisagez l'utilisation d'inhibiteurs de phosphatases pour préserver les états de phosphorylation.
• En immunoprécipitation (IP), l'anticorps peut capturer des complexes FTO-ARN ; utilisez des conditions de réticulation ou sans RNase si vous souhaitez préserver les interactions ARN-protéine.
• Pour l'ELISA, confirmez la spécificité par revêtement avec la FTO recombinante et des tests d'inhibition compétitive ; la réactivité croisée indiquée avec la souris et le rat permet des conceptions d'étude sur plusieurs espèces.
• Lors de la comparaison de l'expression entre différents tissus ou traitements, confirmez le chargement égal et prenez en compte la régulation dynamique de FTO par les voies métaboliques et de stress.

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