Anticorps polyclonal de lapin anti-FOXO1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q12778

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de FOXO1

• FOXO1 (Forkhead box protein O1, également connu sous le nom de FKHR ou FOXO1A) est un facteur de transcription de la famille forkhead box, avec un poids moléculaire d'environ 70 kDa (prédit à 69,7 kDa).
• Il agit comme la cible principale de la signalisation de l'insuline, régulant l'homéostasie métabolique en réponse au stress oxydatif (PubMed:10358076, PubMed:12228231, PubMed:15220471). Références connexes : PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• FOXO1 se lie à l'élément de réponse à l'insuline (IRE) et à l'élément de liaison de la famille Daf-16 (DBE) pour moduler la transcription des gènes cibles, et son activité est supprimée par l'insuline (PubMed:10358076). Références connexes : PMID:10358076
• Les fonctions clés incluent la promotion de la gluconéogenèse dans les hépatocytes via la coopération avec PPARGC1A et CEBPA (PubMed:17024043), le contrôle de l'équilibre redox et de la masse osseuse, et la régulation du nombre d'ostéoblastes et de l'engagement chondrogénique (Par similitude). Références connexes : PMID:17024043
• FOXO1 est un régulateur important de la mort cellulaire, favorisant l'apoptose dans les cellules neuronales (PubMed:18356527), les cellules musculaires lisses cardiaques (PubMed:19483080) et la mort cellulaire médiée par l'autophagie (PubMed:20543840). Références connexes : PMID:18356527 PMID:19483080 PMID:20543840
• La localisation subcellulaire est dynamique : FOXO1 transite entre le cytoplasme et le noyau en réponse à des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation et l'acétylation.
• Il est fortement exprimé dans le muscle squelettique et l'ovaire, à des niveaux plus faibles dans le cœur, le placenta, le poumon, le foie, le pancréas, la rate, le testicule et l'intestin grêle, et faiblement exprimé dans le cerveau, le thymus, la prostate et le côlon (PubMed:9479491). Références connexes : PMID:9479491
• FOXO1 est soumis à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui modulent son activité de transcription et sa stabilité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène englobe les acides aminés 340 à 580 situés dans la région régulatrice C-terminale de FOXO1, qui contient des sites critiques de phosphorylation et d'acétylation ; ainsi, cet anticorps peut détecter à la fois la forme totale et les formes modifiées. Envisagez une validation par un traitement à la phosphatase ou à la désacétylase lors de l'évaluation d'états de modification spécifiques.
• Pour le Western blot (WB), une bande à ~70 kDa est attendue ; incluez des témoins positifs tels que des lysats de HeLa, HepG2 ou de muscle squelettique, car FOXO1 est fortement exprimé dans ces tissus.
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), FOXO1 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, la translocation nucléaire étant favorisée par le stress oxydatif ou la privation sérique. Optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour préserver la localisation endogène.
• Pour l'ELISA, envisagez de coupler avec un anticorps de détection ciblant un épitope distinct pour améliorer la spécificité ; confirmez les performances en utilisant la protéine FOXO1 recombinante.
• En tant qu'anticorps polyclonal de lapin, une variabilité d'un lot à l'autre peut survenir ; une validation indépendante par extinction médiée par le siARN ou un peptide bloquant est recommandée pour les expériences critiques.

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