Anticorps monoclonal anti-FMRP pour WB, IHC-P, ELISA - Q06787

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la FMRP

• La FMRP (Fragile X messenger ribonucleoprotein 1), codée par le gène FMR1, est une protéine liant l'ARN multifonctionnelle associée aux polyribosomes, essentielle au développement neuronal et à la plasticité synaptique. Elle régule l'épissage alternatif des ARNm, la stabilité des ARNm, le transport dendritique et la synthèse protéique locale au niveau des synapses. Références associées : PMID:12417522 PMID:16631377 PMID:18653529 PMID:30765518 PMID:31439799 PMID:11157796 PMID:11532944 PMID:12594214
• Agit à la fois comme répresseur et activateur de la traduction des ARNm cibles. Au niveau des synapses, il réprime généralement la traduction via le complexe CYFIP1-EIF4E-FMR1 et par la formation de granules ribonucléoprotéiques à séparation de phase qui inhibent la traduction. Cependant, après stimulation du récepteur métabotropique du glutamate (mGluR), il peut activer la traduction d'un sous-ensemble d'ARNm dendritiques. Références associées : PMID:12417522 PMID:31439799 PMID:30765518 PMID:11157796 PMID:11532944 PMID:12594214
• Se lie à des motifs ARN spécifiques, notamment les structures G-quadruplex, les séquences riches en U et les séquences consensus ACU[GU] et [AU]GGA, principalement dans les régions codantes et les 3'UTR des ARNm cibles. Il interagit également avec l'ARN non codant BC1 et divers miARN. Références associées : PMID:23235829 PMID:11719189 PMID:18579868 PMID:25464849 PMID:12927206
• Se localise majoritairement dans le cytoplasme, en particulier au niveau des projections neuronales : dendrites, axones, épines dendritiques et cônes de croissance. On le trouve dans les granules ribonucléoprotéiques, les granules de stress et au niveau des sites synaptiques (à la fois présynaptiques et postsynaptiques). Sa localisation nucléaire inclut le nucléole, les corps de Cajal et le centromère. Il s'associe également à la membrane cellulaire.
• Il est modifié post-traductionnellement par acétylation, méthylation et phosphorylation (y compris une phosphorylation favorisant la séparation de phase). L'ubiquitination est également décrite. Des mutations du gène FMR1 causent le syndrome de l'X fragile (déficience intellectuelle) et l'insuffisance ovarienne précoce ; la protéine est impliquée dans la neurodégénérescence.
• Présente une expression tissu-spécifique, principalement dans le cerveau, le cervelet, les testicules et les tissus épithéliaux. Au niveau protéique, elle est détectée dans les neurones, les cellules de Purkinje, les spermatogonies et les lymphocytes.
• In vitro, la FMRP se lie préférentiellement aux homopolymères d'ARN poly(G) et poly(U). Références associées : PMID:12950170 PMID:15381419 PMID:7688265 PMID:24204304

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les résidus 1–100 de la FMRP humaine (Q06787) ; l'anticorps est donc attendu pour reconnaître la région N-terminale. Pour le western blot (WB), une bande d'environ 71 kDa est prédite ; il est recommandé d'utiliser des lysats de cerveau ou de testicule (expression endogène élevée) comme contrôles positifs.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), un coloration optimale peut nécessiter une récupération d'antigène et une titration soigneuse ; une validation sur des tissus neuronaux humains, de souris ou de rat est recommandée.
• En ELISA, le peptide immunogène peut servir d'étalon pour les tests quantitatifs ; associé à un anticorps de détection approprié, ce clone peut être adapté au développement d'un ELISA sandwich.
• En tant qu'anticorps monoclonal de lapin, ce réactif offre une reproductibilité constante d'un lot à l'autre et une haute affinité, mais chaque nouveau lot doit être validé dans le système d'essai spécifique de l'utilisateur final.

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