Anticorps monoclonal anti-Flt3/CD135 pour FC, ELISA - P36888

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de FLT3

• FLT3 (Fms-like tyrosine kinase 3), également désigné CD135, FLK2 et STK1, est une tyrosine kinase de type récepteur qui agit comme récepteur membranaire pour la cytokine FLT3LG. Il joue un rôle central dans la régulation de la différenciation, la prolifération et la survie des cellules progénitrices hématopoïétiques et des cellules dendritiques.
• Après liaison à son ligand, FLT3 active de nombreuses voies de signalisation en aval, notamment la phosphorylation de SHC1 et AKT1, l'activation de la voie mTOR, de la signalisation RAS et des cascades MAPK/ERK, favorisant ainsi la croissance cellulaire et inhibant l'apoptose.
• FLT3 appartient à la famille des récepteurs tyrosine kinases de classe III, caractérisée par une région extracellulaire à cinq domaines de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire unique et un domaine kinase intracellulaire ; l'épissage alternatif génère des isoformes aux propriétés distinctes.
• Au niveau sous-cellulaire, FLT3 se localise principalement sur la membrane plasmique ; il est également détecté dans la lumière du réticulum endoplasmique, ce qui est cohérent avec sa biosynthèse et son trafic membranaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation, la phosphorylation et la conjugaison à l'ubiquitine, qui régulent son activité, sa stabilité et sa signalisation ; les mutations entraînant une activation constitutive sont associées à la leucémie myéloïde aiguë (LMA).
• L'expression tissulaire est particulièrement marquée dans la moelle osseuse, notamment au niveau des cellules souches hématopoïétiques, des progéniteurs myéloïdes et des progéniteurs granulocytes/macrophages ; il est également détecté dans le foie, le thymus, la rate, les ganglions lymphatiques, et à des niveaux plus faibles dans le rein et le pancréas, avec une expression élevée dans la leucémie à lymphocytes T.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre le domaine extracellulaire N-terminal (acides aminés 27 à 163), ce qui indique que cet anticorps monoclonal peut reconnaître l'épitope extracellulaire natif, le rendant potentiellement adapté à la cytométrie en flux (FC) pour détecter FLT3 à la surface cellulaire.
• Pour les applications ELISA, il est recommandé d'associer cet anticorps à un anticorps de détection validé pour établir un ELISA sandwich sensible ; les concentrations de travail optimales doivent être déterminées expérimentalement pour chaque système d'analyse.
• Compte tenu de la glycosylation de FLT3 et de sa potentielle dimérisation, le Western blot dénaturant peut nécessiter une optimisation attentive ; les variants de poids moléculaire (108 et 113 kDa) correspondent à des glycosylation différentielles ou à des formes précurseurs.
• L'anticorps est spécifique de FLT3 humain ; la réactivité croisée avec d'autres espèces ou d'autres récepteurs tyrosine kinases doit être vérifiée indépendamment sur la matrice d'échantillon concernée.

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