Anticorps monoclonal anti-Flotilline-1 pour WB, IHC-P, ELISA - O75955

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la Flotilline-1

• La Flotilline-1 (FLOT1) est une protéine de 47 kDa codée par le gène FLOT1 chez l’humain et appartient à la famille des flotillines, des protéines associées aux radeaux lipidiques.
• Elle joue le rôle de protéine d’échafaudage au sein des membranes cavéolaires et pourrait participer à la formation des cavéoles ou de vésicules semblables aux cavéoles, contribuant ainsi à la courbure membranaire et au trafic vésiculaire.
• La protéine se localise principalement au niveau de la membrane cellulaire, notamment dans les cavéoles et les radeaux membranaires, mais elle est également présente dans les endosomes et les mélanosomes, ce qui indique des rôles dans l’endocytose et la biogenèse des organites.
• La Flotilline-1 subit un épissage alternatif, produisant des isoformes pouvant avoir des fonctions ou des localisations distinctes.
• Il s’agit d’une phosphoprotéine, ce qui suggère une régulation par les voies de signalisation des kinases, et sa structure tridimensionnelle est connue, facilitant les études structure-fonction.
• Elle est largement utilisée comme marqueur des radeaux lipidiques et fait partie du protéome de référence, soulignant son rôle fondamental en biologie cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps monoclonal de lapin a été produit contre une protéine recombinante couvrant les acides aminés 155 à 427 de la Flotilline-1 humaine, qui englobe la région C-terminale contenant les domaines conservés des flotillines. Il devrait reconnaître la Flotilline-1 endogène pleine longueur dans les échantillons humains, murins et de rat.
• Pour le WB, une bande d’environ 47 kDa est attendue. Utiliser des conditions réductrices standard et des lysats cellulaires totaux provenant de lignées telles que HeLa ou HEK293. La validation par KO confirme sa spécificité ; envisager d’utiliser des cellules knock-out comme contrôle négatif.
• Pour l’IHC-P, effectuer les essais sur des coupes de tissus fixées au formol et incluses en paraffine, après une récupération des épitopes induite par la chaleur. Le marquage peut être membranaire et/ou ponctué, reflétant la localisation dans les cavéoles et les endosomes.
• Pour l’ELISA, l’utiliser comme anticorps de capture ou de détection dans des immunodosages en sandwich après avoir confirmé la compatibilité de la paire. Valider les conditions du test avec la protéine Flotilline-1 recombinante.
• Noter que l’immunogène est une protéine de fusion recombinante ; la constance entre les lots peut influencer les performances. Optimiser empiriquement les dilutions dans le système d’échantillons concerné.

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