Anticorps polyclonal de lapin anti-FLG pour WB, ELISA - P20930

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la filaggrine

• La filaggrine (FLG) est une grande protéine basique riche en histidine qui agrège les filaments intermédiaires de kératine dans l'épiderme, formant la matrice structurelle de l'enveloppe cornée des cellules.
• Elle favorise la formation de liaisons disulfure entre les filaments intermédiaires, contribuant à la résistance mécanique et à la fonction barrière de la peau.
• La FLG est principalement exprimée dans la couche granuleuse de l'épiderme, où elle est synthétisée sous forme d'un grand précurseur, la profilaggrine, qui est ensuite clivée par protéolyse en monomères de filaggrine actifs.
• Au niveau subcellulaire, la filaggrine se localise dans les granules de kératohyaline cytoplasmiques des kératinocytes de la couche granuleuse.
• La protéine contient de nombreuses répétitions de filaggrine qui facilitent la liaison à la kératine et l'agrégation des filaments ; sa fonction est régulée par les ions calcium et des modifications post-traductionnelles comme la citrullination.
• En tant que protéine développementale, la FLG joue un rôle essentiel dans la différenciation terminale des kératinocytes et la formation d'une barrière cutanée imperméable à l'eau.
• Les mutations du gène FLG sont un facteur de prédisposition majeur pour l'ichtyose vulgaire et la dermatite atopique, ce qui souligne son importance clinique dans les pathologies cutanées.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 1 à 92 de la FLG humaine (région N-terminale). Cette région est probablement conservée entre les espèces, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée rapportée avec la souris et le rat. Validez la réactivité croisée dans votre système d'échantillons si vous utilisez des modèles non humains.
• Les applications recommandées sont le Western blotting (WB) et l'ELISA. Pour le WB, notez le poids moléculaire élevé (~435 kDa) ; envisagez d'utiliser un gel à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés pour garantir un transfert efficace de la protéine.
• Compte tenu du poids moléculaire élevé et de la nature répétitive de la filaggrine, envisagez d'utiliser des échantillons frais ou bien conservés pour éviter la dégradation protéique, et ajoutez des inhibiteurs de protéases pendant la préparation des échantillons.

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