Anticorps polyclonal de lapin anti-protéine d'activation des fibroblastes α (FAP) pour WB, IF/ICC, ELISA - Q12884

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine d'activation des fibroblastes alpha (FAP)

• La FAP, également appelée seprase et SIMP, est une sérine protéase glycoprotéique de surface cellulaire.
• Ses activités endopeptidasique et dipeptidyl peptidasique ciblent des substrats comme l'alpha-2-antiplasmine, SPRY2 et les neuropeptides (NPY, PYY, substance P), avec une préférence pour les séquences consensus Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala.
  Références associées : PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248, PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817
• La FAP dégrade la gélatine et le collagène de type I dénaturé par la chaleur, facilitant l'adhésion, la migration et l'invasion cellulaires lors du remodelage tissulaire.
  Références associées : PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466
• Dans les tumeurs, la FAP favorise l'invasion du gliome en dégradant le brévicane et stimule l'angiogenèse, la dégradation du collagène et l'échappement immunitaire, soutenant la progression maligne.
• Au niveau subcellulaire, la FAP se trouve sur la membrane cellulaire, les lamellipodes, les invadopodes et les crêtes membraneuses ; elle peut également être sécrétée ou présente dans le cytoplasme.
• L'expression tissulaire est restreinte aux fibroblastes activés (par exemple lors de la cicatrisation, dans le stroma cancéreux, le foie cirrhotique), aux cellules de gliome et au tissu adipeux, mais elle est absente du foie normal.
• Le gène FAP produit au moins deux isoformes par épissage alternatif, toutes deux exprimées dans les lignées cellulaires de mélanome, de carcinome et de fibroblastes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de la FAP est d'environ 88 kDa ; utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple 8 à 10 % de SDS-PAGE) et confirmez la spécificité de la bande avec des contrôles adaptés.
• En immunofluorescence/ICC, les étapes de perméabilisation sont essentielles pour détecter la FAP localisée à la membrane ; validez la coloration dans des lignées cellulaires positives telles que les fibroblastes activés ou les cellules cancéreuses.
• Pour les applications ELISA, cet anticorps polyclonal peut servir de réactif de capture ou de détection ; l'optimisation de l'appariement et un blocage adapté sont recommandés.
• Compte tenu de la nature polyclonale et de l'immunogène quasi complet, l'anticorps reconnaît probablement plusieurs épitopes, ce qui peut être avantageux pour détecter des variants chez l'homme, la souris et le rat.
• Vérifiez la réactivité croisée avec des échantillons de souris et de rat à l'aide de contrôles positifs spécifiques de l'espèce, car les niveaux d'expression peuvent varier.
• Prenez en compte que la FAP soluble est présente dans certains fluides biologiques, ce qui pourrait entrer en compétition avec les formes liées à la membrane dans certains dosages.

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