Anticorps polyclonal de lapin anti-fibrillarine/U3 RNP pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P22087

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la fibrillarine/U3 RNP

• La fibrillarine, codée par le gène FBL (également connu sous les noms FIB1 et FLRN), est une protéine nucléolaire hautement conservée. Elle a été initialement identifiée comme l'antigène nucléolaire de la sclérodermie de 34 kDa.
• Elle fonctionne comme une méthyltransférase dépendante de la S-adénosyl-L-méthionine, catalysant la 2'-O-méthylation spécifique de sites des groupements ribose de l'ARN ribosomique précurseur (pré-ARNr), guidée par les petits ARN nucléolaires (snoARN) de type boîte C/D (par similitude). Références associées : PMID:30540930
• La fibrillarine est un composant central du processusome de la petite sous-unité (SSU), le précurseur le plus précoce de la petite sous-unité ribosomique, et contribue au repliement, aux modifications et au clivage du pré-ARNr. Références associées : PMID:34516797
• Au-delà de la méthylation de l'ARN, la fibrillarine agit comme une méthyltransférase protéique et assure la méthylation de l'histone H2A au niveau de la glutamine 105 (H2AQ104me), ce qui compromet la liaison du complexe FACT au locus de l'ADN ribosomique. Références associées : PMID:24352239, PMID:30540930
• Elle catalyse également la 2'-O-méthylation du petit ARN nucléaire U6 (snARN) au sein des complexes RNP de type boîte C/D, une modification essentielle à la fidélité de l'épissage du pré-ARNm. Références associées : PMID:32017898
• Au niveau subcellulaire, la fibrillarine réside principalement dans le nucléole, avec une présence supplémentaire dans le nucléoplasme, ce qui reflète ses rôles dans le traitement de l'ARN ribosomique et l'épissage.
• Les modifications post-traductionnelles de la fibrillarine comprennent l'acétylation, la phosphorylation et la méthylation, ainsi que la formation de liaisons isopeptidiques et la conjugaison de type ubiquitine, lesquelles peuvent réguler son activité et sa localisation.
• La protéine a un poids moléculaire de 33 784 Da et est largement étudiée comme marqueur de la structure et de la fonction nucléolaires.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 100-321) couvre une région centrale de la fibrillarine, hautement conservée entre les espèces ; une réactivité croisée avec les protéines de souris, de rat et de singe est donc attendue.
• En western blot, une bande principale d'environ 34 kDa doit être observée, correspondant à la protéine complète ; des bandes supplémentaires peuvent apparaître en raison de modifications post-traductionnelles ou d'isoformes.
• En immunofluorescence, la fibrillarine se localise dans le nucléole et le nucléoplasme ; un co-marquage avec des marqueurs nucléolaires tels que la nucléoline peut confirmer la spécificité.
• Pour l'immunoprécipitation, optimisez la concentration de l'anticorps et les conditions d'incubation ; envisagez d'utiliser des extraits nucléaires afin d'enrichir la protéine cible.
• Effectuez des contrôles appropriés (par exemple, peptide bloquant ou lysats issus d'un modèle knockout) afin de confirmer la spécificité de l'anticorps dans votre système d'analyse.

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