Anticorps polyclonal Anti-FH (Fumarate Hydratase) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P07954

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Fumarate Hydratase

• La FH catalyse la conversion stéréospécifique réversible du fumarate en L-malate, une réaction centrale à la production énergétique mitochondriale et aux voies métaboliques cytosoliques. Références connexes : PMID:30761759
• Dans le cycle de l'acide tricarboxylique (TCA) mitochondrial, la FH hydrate le fumarate en L-malate, contribuant à la génération de NADH. Dans le cytosol, elle déshydrate le L-malate en fumarate, soutenant le cycle de l'urée et le catabolisme de l'arginine.
• L'initiation alternative de la traduction produit des isoformes mitochondriales et cytosoliques, qui peuvent présenter des préférences catalytiques opposées selon des preuves provenant d'autres espèces (Probable).
• La FH participe à la réparation des cassures double brin de l'ADN en transloquant dans le noyau après des dommages à l'ADN et en favorisant la jonction d'extrémités non homologues (NHEJ). Elle catalyse la formation de fumarate, qui inhibe la déméthylase histonique KDM2B, entraînant une élévation de H3K36me2 et facilitant l'assemblage des protéines de réparation. Références connexes : PMID:20231875 PMID:26237645
• La localisation subcellulaire s'étend aux mitochondries, au cytoplasme, au noyau et aux chromosomes ; l'accumulation nucléaire est induite par le stress génotoxique et la phosphorylation par PRKDC.
• La FH agit comme un suppresseur de tumeur ; les mutations germinales sont liées à la léiomyomatose héréditaire et au cancer rénal (HLRCC) ainsi qu'au déficit en fumarate hydratase.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, régulent l'activité de la FH et son trafic intracellulaire.
• La FH est exprimée dans les globules rouges, et des niveaux cytoplasmiques réduits ont été observés chez des patients atteints d'anémie hémolytique non sphérocytaire héréditaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 45 à 510 de la FH humaine, englobant la majorité de la séquence protéique. Cette conception permet probablement de détecter à la fois les isoformes mitochondriales et cytosoliques.
• Pour l'analyse par Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 55 kDa. Plusieurs bandes peuvent apparaître en raison de différences d'isoformes ou de modifications post-traductionnelles ; validez la spécificité à l'aide de témoins appropriés.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), optimisez les protocoles de récupération d'antigène et de fixation. Des témoins tissulaires positifs et négatifs exprimant la FH à des niveaux connus sont recommandés.
• Dans les applications ELISA, envisagez d'utiliser la protéine FH recombinante comme standard pour les dosages quantitatifs et vérifiez la réactivité croisée avec les protéines homologues d'autres espèces.

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