Anticorps polyclonal anti-FH (fumarate hydratase) pour WB, ELISA - P07954

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la FH (fumarate hydratase)

• La FH catalyse l’hydratation réversible du fumarate en L-malate dans le cycle de l’acide tricarboxylique, une étape clé de la production d’énergie mitochondriale (PubMed:30761759). Références associées : PMID:30761759

• Les isoformes cytosoliques de la FH participent au cycle de l’urée et au métabolisme de l’arginine, en produisant du fumarate comme sous-produit (par similarité).

• La FH est annotée comme suppresseur de tumeur et protéine variant pathologique ; les mutations sont associées à des syndromes héréditaires de prédisposition au cancer tels que le HLRCC.

• En réponse aux dommages de l’ADN, la FH est phosphorylée par PRKDC et se transloque vers le noyau, où elle favorise la réparation par jonction d’extrémités non homologues (NHEJ) en inhibant la déméthylase KDM2B, ce qui entraîne une augmentation de H3K36me2 au niveau des cassures double brin (DSB) (PubMed:20231875, PubMed:26237645). Références associées : PMID:20231875, PMID:26237645

• La FH se localise principalement dans les mitochondries, mais également dans le cytosol ; une accumulation nucléaire survient après des dommages de l’ADN (PubMed:26237645).

• Une initiation alternative produit différentes isoformes pouvant favoriser soit les réactions d’hydratation, soit les réactions de déshydratation (probable).

• La FH est exprimée dans les globules rouges et est sous-exprimée chez les patients atteints d’anémie hémolytique héréditaire non sphérocytaire d’étiologie inconnue.

• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation et la phosphorylation ; la phosphorylation médiée par PRKDC au niveau des DSB est essentielle à son rôle dans la réparation de l’ADN.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 50 à 150 de la FH humaine ; envisagez d’utiliser des contrôles positifs tels que des lysats de HeLa ou de HEK293T pour la WB.
• Pour le Western blot, une bande spécifique d’environ 55 kDa doit être observée ; utilisez des contrôles de chargement et des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• Le fractionnement subcellulaire peut améliorer la détection des pools mitochondriaux ou nucléaires de FH.
• Pour l’ELISA, optimisez l’antigène de revêtement et le titrage de l’anticorps afin d’obtenir les meilleurs rapports signal/bruit.
• La réactivité croisée avec la FH de souris et de rat permet des études multiespèces ; validez les résultats dans votre système expérimental.
• La préadsorption avec le peptide immunisant peut confirmer la spécificité de la bande.

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