Anticorps monoclonal anti-FGFR4 pour WB, ELISA - P22455

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du FGFR4

• Le récepteur 4 du facteur de croissance des fibroblastes (FGFR4) est une tyrosine-protéine kinase qui sert de récepteur de surface cellulaire pour les facteurs de croissance des fibroblastes (FGF). Il régule la prolifération, la différenciation, la migration cellulaire, le métabolisme des lipides, la biosynthèse des acides biliaires, l'absorption du glucose, le métabolisme de la vitamine D et l'homéostasie du phosphate.
• La liaison du ligand déclenche l'activation de cascades de signalisation en aval, notamment les voies PLCG1 et FRS2, conduisant à la production de seconds messagers (DAG, IP3) et à l'activation des voies RAS-MAPK et AKT.
• La signalisation du FGFR4 est régulée négativement par l'internalisation et la dégradation du récepteur ; la protéase matricielle MMP14 favorise l'internalisation et la dégradation lysosomale du FGFR4. Des mutations activatrices constitutives ou une inactivation altérée conduisent à une signalisation aberrante.
• Le récepteur se localise au niveau de la membrane cellulaire, des endosomes, du réticulum endoplasmique, et il existe sous une forme sécrétée. Il est exprimé dans les cellules épithéliales gastro-intestinales, le pancréas et les lignées cellulaires cancéreuses gastriques et pancréatiques.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, et la protéine subit des modifications post-traductionnelles, notamment la glycosylation, la phosphorylation et la conjugaison à l'ubiquitine (conjugaison Ubl).
• Mots-clés : liaison à l'ATP, kinase, hélice transmembranaire, domaine immunoglobuline, pont disulfure, glycoprotéine, phosphoprotéine et récepteur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Étant donné que l'immunogène est un peptide synthétique correspondant à la région C-terminale (acides aminés 700–802), l'anticorps est susceptible de reconnaître le FGFR4 pleine longueur ainsi que les isoformes contenant cet épitope. Envisagez un alignement de séquence pour vérifier la conservation de l'épitope entre les espèces.
• Pour le Western blot, une bande à environ 88 kDa est attendue pour le FGFR4 dans les échantillons humains, de souris et de rat. Utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, SDS-PAGE à 8–10 %) pour une résolution optimale. Envisagez de commencer avec une plage de dilution de l'anticorps primaire de 1:1 000 à 1:5 000 et validez dans votre système expérimental.
• Pour l'ELISA, titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de revêtement et les conditions de détection optimales. Assurez-vous que la protéine FGFR4 recombinante ou l'antigène peptidique correspond à la région de l'immunogène pour éviter les faux négatifs.

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