Anticorps polyclonal anti-FEN-1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P39748

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de FEN-1

• FEN-1 (Flap endonucléase 1), également appelée DNase IV, MF1 ou RAD2, est une nucléase spécifique de structure possédant à la fois une activité 5'-flap endonucléase et 5'-3' exonucléase.
• Elle joue un rôle critique dans la réplication de l'ADN en clivant les structures de rabats en surplomb 5' générées lors du traitement des fragments d'Okazaki, laissant une nick pour la ligature.
• Elle participe à la voie de réparation par excision de bases à long fragment (LP-BER), en clivant au sein des rabats terminés par site AP.
• Elle agit comme facteur de stabilisation du génome en empêchant les rabats de s'équilibrer en structures susceptibles de provoquer des duplications et des délétions.
• Elle présente également une activité exonucléase 5'-3' sur l'ADN double brin nické ou échancre, et possède une activité RNase H.
• Elle est impliquée dans la réplication et la réparation de l'ADN ribosomique (ADNr) et de l'ADN mitochondrial.
• Sa localisation subcellulaire est majoritairement nucléaire, incluant le nucléole et le nucléoplasme, mais une localisation mitochondriale a également été rapportée.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la méthylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler sa fonction et ses interactions.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 50-380 de la FEN-1 humaine, couvrant la majorité de la protéine, ce qui peut favoriser la reconnaissance de plusieurs épitopes.
• Pour le Western blot (WB), attendez une bande à environ 43 kDa ; envisagez d'utiliser des lysats cellulaires entiers de lignées cellulaires humaines ou murines.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunofluorescence (IF/ICC), une coloration nucléaire est attendue, mais une localisation mitochondriale peut également être observée ; optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation.
• En immunoprécipitation (IP) et en ELISA, la nature polyclonale peut améliorer l'efficacité de capture ; validez avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• La réactivité croisée avec la souris a été confirmée ; pour les autres espèces, réalisez un alignement de séquences et une validation expérimentale avant utilisation.
• Stockez à -20°C comme recommandé pour une stabilité à long terme ; évitez les cycles répétés de congélation-décongélation.

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