Anticorps polyclonal anti-FDX1/ADX pour WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P46656

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'adrénodoxine (ferrédoxine-1)

• L'adrénodoxine, également appelée ferrédoxine-1, est une petite protéine à fer-soufre codée par le gène FDX1 chez les mammifères.
• Elle agit comme transporteur mobile d'électrons dans la matrice mitochondriale, acheminant les électrons de l'adrénodoxine réductase vers les enzymes mitochondriales du cytochrome P450.
• Elle joue un rôle clé dans la stéroïdogenèse : elle transfère des électrons au CYP11A1, qui catalyse la première étape limitante de la biosynthèse des hormones stéroïdes (clivage de la chaîne latérale du cholestérol).
• La protéine contient un cluster [2Fe-2S] essentiel à son activité de transfert d'électrons ; elle ne forme pas de complexe ternaire et navigue entre la réductase et le P450.
• Sa localisation subcellulaire est strictement limitée à la matrice mitochondriale, où elle participe au métabolisme des stéroïdes et des lipides.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation ; la protéine est synthétisée sous forme de précurseur avec un peptide de transit qui est clivé lors de l'import mitochondrial.
• Au-delà du transport d'électrons, elle est impliquée dans la biogenèse plus large des clusters fer-soufre mitochondriaux et l'homéostasie redox cellulaire.
• Le gène FDX1 est très conservé entre les espèces, et son produit est exprimé majoritairement dans les tissus stéroïdogènes comme le cortex surrénalien et les gonades.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu de la région centrale de la protéine FDX1 de souris, qui partage une forte homologie avec les protéines humaine et rat, ce qui explique la réactivité croisée.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 20 kDa ; nous recommandons l'utilisation d'un gel SDS-PAGE 12-15% pour une résolution optimale.
• En immunoprécipitation (IP) et en immunofluorescence (IF/ICC), assurez-vous de maintenir l'intégrité mitochondriale pendant la préparation de l'échantillon ; une fixation courte peut améliorer l'accessibilité de l'antigène.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de récupération d'antigène comme la récupération d'épitope induite par la chaleur dans un tampon citrate (pH 6,0) peuvent améliorer la détection.
• Cet anticorps peut être utilisé en ELISA ; titrez la concentration de l'antigène de revêtement et de l'anticorps pour obtenir une gamme de détection linéaire.
• Validez l'anticorps sur l'espèce et le type de tissu concernés, en particulier sur des tissus stéroïdogènes comme la glande surrénale, le testicule ou l'ovaire.

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