Anticorps polyclonal de lapin anti-FCN1 pour WB et ELISA - O00602

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Ficoline-1

• La Ficoline-1 (également connue sous le nom de M-ficoline, ficoline-A, ficoline-alpha) est une lectine de type collagène sécrétée de 35 kDa codée par le gène FCN1 (GeneID : 2219) appartenant à la famille des ficolines de molécules de reconnaissance de motifs.
• Agit comme un récepteur de reconnaissance de motifs qui se lie à des structures glucidiques spécifiques à la surface des pathogènes pour initier la voie des lectines du complément via l'activation de la sérine protéase MASP1, conduisant à la phagocytose des pathogènes et à la signalisation immunitaire adaptative. Références associées : PMID:16116205, PMID:17897951, PMID:20032467
• Reconnaît préférentiellement les dérivés d'acide sialique liés en 2-6 O-acétylés et les glycanes contenant de l'acide sialique avec des liaisons 2-3. Références associées : PMID:20032467, PMID:20400674
• Peut également activer les monocytes via le récepteur couplé aux protéines G FFAR2, induisant la sécrétion d'interleukine-8/IL-8. Références associées : PMID:21037097
• Localisée en tant que protéine sécrétée et ancrée à la surface cellulaire des cellules immunitaires.
• Exprimée dans les leucocytes du sang périphérique, les monocytes et les granulocytes ; également détectée dans la rate, le poumon et le thymus (attribué aux macrophages tissulaires). Absente sur les lymphocytes.
• Contient une région de type collagène et un domaine de lectine de type fibrinogène ; la liaison dépendante du calcium et la formation de ponts disulfures contribuent à son oligomérisation et à son intégrité structurelle (structure 3D résolue ; identification par protéomique ; protéome de référence ; peptide signal).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 30 à 326, englobant presque la totalité du FCN1 ; l'anticorps polyclonal résultant est censé cibler plusieurs épitopes, fournissant un signal robuste à la fois dans des conditions dénaturantes (WB) et natives (ELISA).
• Pour le Western blot, réduisez les échantillons avec du DTT/β-mercaptoéthanol pour détecter la forme monomérique de 35 kDa ; notez que les oligomères liés par ponts disulfures peuvent apparaître à des masses moléculaires plus élevées dans des conditions non réductrices.
• Validez la spécificité sur des échantillons connus exprimant le FCN1 (par exemple, cellules mononucléaires du sang périphérique humain, lignées monocytaires U937 ou THP-1) et utilisez un témoin négatif (lymphocytes ou knockdown) pour confirmer la bande d'intérêt.
• Dans l'ELISA, effectuez des titrations en damier (checkerboard) en utilisant la ficoline-1 recombinante ou le sérum pour optimiser les concentrations d'anticorps de capture et de détection ; envisagez de tester l'anticorps comme composant de capture et de détection.
• Lors de l'utilisation avec des échantillons de souris ou de rat, vérifiez la réactivité avec des témoins positifs spécifiques à l'espèce, car l'homologie de séquence est d'environ 80 %, mais la reconnaissance des épitopes peut varier.
• Collectez le sang et préparez le sérum/plasma dans des conditions empêchant l'activation involontaire du complément pour éviter la consommation de protéines ou la formation de complexes.
• La cohérence d'un lot à l'autre peut différer entre les anticorps polyclonaux ; demandez des échantillons de conservation ou effectuez une étude de pontage (bridging study) si vous changez de lots pour des essais critiques.

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