Anticorps polyclonal de lapin anti-FCGR2B pour WB, IF-P, ELISA - P31994

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de FCGR2B

• FCGR2B, également connu sous les noms CD32, FcγRIIB ou CD32B, est un récepteur de faible affinité pour la région Fc des immunoglobulines gamma (IgG) complexées ou agrégées. Il appartient à la superfamille des immunoglobulines.
• Le récepteur existe sous plusieurs isoformes (par exemple IIB1 et IIB2) produites par épissage alternatif. L'isoforme IIB1 ne possède pas les motifs nécessaires à l'endocytose et à la phagocytose, tandis que l'isoforme IIB2 ne déclenche pas la phagocytose après la liaison au ligand.
• FCGR2B joue un rôle immunorégulateur essentiel en réduisant l'activation cellulaire déclenchée par les récepteurs des cellules B (BCR), les récepteurs des cellules T (TCR) ou d'autres récepteurs Fc, contribuant ainsi à moduler la production d'anticorps et la gestion des complexes immuns.
• Il est principalement localisé sur la membrane cellulaire en tant que protéine membranaire de type I à passage unique, avec une région extracellulaire contenant deux domaines de type immunoglobuline, une hélice transmembranaire et une queue cytoplasmique.
• La protéine est largement distribuée dans les lignées myéloïdes et lymphoïdes, notamment les monocytes, les neutrophiles, les macrophages, les basophiles, les éosinophiles, les cellules de Langerhans, les cellules B, les plaquettes et les cellules endothéliales placentaires. Elle n'est pas détectée sur les cellules tueuses naturelles.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la glycosylation liée à l'azote, la formation de ponts disulfure et la phosphorylation, qui régulent son activité et ses interactions.
• Les variations génétiques et les réarrangements chromosomiques impliquant FCGR2B ont été associés à des maladies auto-immunes telles que le lupus érythémateux systémique (LES).
• De plus, FCGR2B agit comme un proto-oncogène et a été impliqué dans les interactions hôte-virus, ce qui souligne son rôle multifonctionnel dans l'immunité et les maladies.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 43–217 du domaine extracellulaire et cible une région essentielle à la liaison au ligand ; il convient de vérifier l'accessibilité de l'épitope dans des conditions natives et dénaturées pour des applications telles que l'IF-P et le WB.
• Pour le western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 34 kDa, mais les bandes réelles peuvent se déplacer en raison de la glycosylation ; incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés dans votre plan expérimental.
• En immunofluorescence sur des coupes incluses en paraffine (IF-P), optimisez les étapes de récupération antigénique et de perméabilisation afin d'assurer la détection de la protéine liée à la membrane.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, évaluez la réactivité croisée avec les autres membres de la famille FcγR et validez la spécificité dans la matrice d'échantillon concernée (par exemple, sérum ou lysats cellulaires).
• Compte tenu de la large réactivité croisée avec les protéines humaines, murines et de rat, confirmez les profils de réactivité spécifiques à chaque espèce dans votre système d'analyse, en particulier lors de la recherche de cibles faiblement abondantes.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être contrôlée ; nous recommandons de tester chaque nouveau lot dans une étude pilote avant de réaliser des expériences à grande échelle.

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