Anticorps polyclonal de lapin anti-Fas pour WB, ELISA - P25445

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Fas

• Fas, également connu sous le nom de CD95, APO-1 et TNFRSF6, est un membre de la superfamille des récepteurs du facteur de nécrose tumoraleuse et un médiateur critique de l'apoptose.
• Il fonctionne comme le récepteur du FASLG (ligand Fas), formant le complexe de signalisation inducteur de mort (DISC) via le recrutement de FADD, ce qui active la caspase-8 et la cascade de caspases en aval pour exécuter l'apoptose.
• L'isoforme 1 de pleine longueur (liée à la membrane) déclenche l'apoptose, tandis que les isoformes sécrétées 2–6 produites par épissage alternatif agissent comme des récepteurs leurres qui bloquent l'apoptose médiée par FASLG in vitro.
• Fas est principalement localisé à la membrane cellulaire, y compris les radeaux membranaires, mais les isoformes sécrétées sont également détectées à l'extérieur de la cellule.
• Les principales modifications post-traductionnelles incluent la glycosylation, la palmitoylation et la phosphorylation, qui régulent son trafic membranaire et sa signalisation.
• Dans les cellules mononucléaires du sang périphérique (PBMC) au repos, l'isoforme 1 et l'isoforme 6 sont exprimées à des niveaux égaux ; lors de l'activation, l'isoforme 1 augmente tandis que l'isoforme 6 diminue, suggérant un commutateur régulateur.
• L'apoptose médiée par Fas est essentielle pour la tolérance périphérique et la mort cellulaire induite par l'activation des lymphocytes T matures, soulignant son rôle dans l'homéostasie immunitaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 200–300 dans le domaine extracellulaire du Fas humain. Cette région est conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui soutient la réactivité croisée.
• Pour le Western blot, plusieurs bandes entre 9–38 kDa peuvent être observées en raison de l'épissage alternatif, de la glycosylation et du clivage membranaire. Validez la spécificité des bandes à l'aide de témoins appropriés.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, envisagez d'utiliser le fragment Fas recombinant comme témoin positif et de pré-incuber l'anticorps avec l'immunogène pour confirmer la spécificité.
• Pour les études impliquant l'activation des cellules immunitaires, notez que l'expression des isoformes de Fas change lors de la stimulation, donc le timing et le type de cellules sont critiques pour la détection.

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