Anticorps monoclonal de lapin anti-FAK (Focal Adhesion Kinase) pour WB, IF/ICC, ELISA - Q05397

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la FAK

• La kinase des adhésions focales 1 (FAK) est une protéine-tyrosine kinase non réceptrice essentielle à la régulation de la migration cellulaire, de l'adhésion, de l'étalement, de la réorganisation du cytosquelette d'actine et de la dynamique des adhésions focales. Elle participe également à la progression du cycle cellulaire, la prolifération et l'apoptose.
• La FAK est nécessaire au développement embryonnaire précoce, à la formation du placenta, à l'angiogenèse et au développement normal du cœur et du système nerveux, incluant la croissance des axones et la formation des synapses.
• Après activation, la FAK forme des complexes de signalisation multi-subunités avec SRC et les membres de la famille SRC, conduisant à la phosphorylation de résidus tyrosine supplémentaires qui servent de sites d'ancrage pour les protéines d'échafaudage, les effecteurs et les substrats, modulant ainsi des voies de signalisation telles que PI3K/AKT et MAPK.
• La FAK phosphoryle NEDD9 après stimulation par les intégrines, contribuant à l'activation de RAC1 via les membres de la famille CAS. Références associées : PMID:9360983
• La protéine se localise dans de multiples compartiments sous-cellulaires, notamment les adhésions focales, la membrane cellulaire, le cytoplasme périnucléaire, le cortex cellulaire, le centrosome, le noyau et le corps basal du cil, ce qui reflète son rôle dynamique dans la transduction de signal et la mécanotransduction.
• L'isoforme 6 (FRNK) n'a pas de domaine kinase et agit comme inhibiteur dominant-négatif de la phosphorylation et de la signalisation de la FAK, atténuant l'accumulation nucléaire de LPXN et limitant la transcription génique dépendante du facteur de réponse au sérum (SRF).
• La FAK est exprimée de manière ubiquitaire et détectée dans les lymphocytes B et T, les fibroblastes pulmonaires et les cellules épithéliales. Références associées : PMID:31630787
• Elle appartient à la superfamille des protéines kinases, à la famille des protéines tyrosine kinases, et est soumise à diverses modifications post-traductionnelles incluant la phosphorylation, l'acétylation et la conjugaison à l'ubiquitine, qui régulent son activité et sa stabilité.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• La séquence de l'immunogène (acides aminés 700-800) se situe en dehors du domaine kinase ; cet anticorps peut reconnaître à la fois la FAK entière et l'isoforme FRNK, offrant une flexibilité pour la détection de l'expression totale de la FAK.
• En WB, attendez une bande autour de 119 kDa ; utilisez des contrôles appropriés d'extraction et de chargement des protéines pour surveiller les niveaux de FAK dans différents types cellulaires ou différentes conditions.
• Pour IF/ICC, la FAK se localise principalement dans les adhésions focales ; optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation pour préserver ces structures et validez la coloration avec des contrôles adaptés dans votre système d'échantillons.
• La réactivité croisée avec des échantillons de souris et de rat est prédite ; vérifiez les performances dans votre organisme modèle pour garantir la spécificité et la sensibilité.
• Les performances de l'anticorps en ELISA peuvent nécessiter une optimisation de l'antigène de revêtement et des conditions de détection ; l'association avec un couple anticorps capture/détection validé peut améliorer le signal.

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