Anticorps polyclonal Anti-EXT2 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q93063

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EXT2

• Code pour l'exostosine-2, une glycosyltransférase de type II transmembranaire qui sert de sous-unité critique du co-polymérase de l'héparane sulfate (HS) ; les noms alternatifs incluent Glucuronosyl-N-acetylglucosaminyl-protéoglycane 4-alpha-N-acetylglucosaminyltransférase et Protéine des exostoses multiples 2.
• Forme un complexe hétérodimérique avec EXT1 pour constituer la polymérase HS active ; ensemble, ils catalysent l'élongation processive du squelette HS par addition alternée d'acide D-glucuronique (GlcA) et de résidus N-acétyl-D-glucosamine (GlcNAc) à partir de leurs donneurs de sucres UDP respectifs. Références connexes : PMID:22660413, PMID:36402845, PMID:36593275
• La sous-unité EXT1 fournit l'activité glucuronosyltransférase, tandis qu'EXT2 est responsable de l'activité N-acétylglucosaminyltransférase ; les deux sont nécessaires pour la fonction complète de la polymérase et la synthèse de la chaîne HS. Références connexes : PMID:36402845, PMID:36593275
• Les protéoglycanes d'héparane sulfate résultants sont des composants ubiquitaires de la matrice extracellulaire et des surfaces cellulaires, jouant des rôles essentiels dans l'homéostasie tissulaire, la signalisation des facteurs de croissance et l'adhésion cellulaire. Références connexes : PMID:19344451, PMID:22660413
• Se localise principalement à la membrane de l'appareil de Golgi, avec une présence dans le réseau cis-Golgi et la membrane du réticulum endoplasmique ; une forme sécrétée a également été signalée.
• Large expression dans les tissus.
• Les mutations dans EXT2 sont associées aux exostoses multiples héréditaires, un trouble autosomique dominant caractérisé par des excroissances osseuses coiffées de cartilage ; la protéine est également classée comme un suppresseur de tumeur.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 80–340) englobe le domaine catalytique de l'EXT2 ; l'anticorps polyclonal résultant est censé reconnaître plusieurs épitopes dans cette région, offrant une détection robuste pour le Western blot dénaturant et les applications natives telles que l'IF/ICC.
• Pour le Western blot, envisagez une plage de dilution de l'anticorps primaire de 1:500 à 1:2000 et validez par rapport au poids moléculaire prédit d'environ 82 kDa ; l'inclusion de contrôles appropriés (par exemple, des lysats surexprimant EXT2 ou des échantillons traités avec siARN) est recommandée.
• En immunofluorescence/ICC, l'EXT2 présente généralement un motif de coloration de type Golgi périnucléaire ; la perméabilisation de la membrane avec 0,1 % de Triton X-100 peut améliorer l'accessibilité tout en préservant la morphologie des organites.
• La performance ELISA est soutenue par l'immunogène protéique recombinant ; envisagez d'utiliser l'anticorps comme réactif de capture ou de détection dans des configurations ELISA sandwich pour la recherche sur les biomarqueurs liés aux HS.
• La réactivité croisée avec l'EXT2 de souris et de rat a été démontrée, permettant une utilisation dans des modèles rongeurs ; cependant, il est conseillé de vérifier la spécificité dans l'espèce et le tissu concernés avant des études à grande échelle.

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