Anticorps monoclonal anti-ETFDH pour WB, IF, IHC, ELISA - Q16134

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ETFDH

• L'ETFDH (électron transfer flavoprotein-ubiquinone oxydoréductase, également connue sous le nom d'ETF déshydrogénase) est une flavoprotéine de la membrane interne mitochondriale qui couple la β-oxydation des acides gras et le catabolisme des acides aminés à la chaîne respiratoire en transférant des électrons de l'électron transfer flavoprotein (ETF) à l'ubiquinone.
• L'enzyme contient du FAD et un cluster 4Fe-4S, fonctionnant comme une oxydoréductase et participant au transport d'électrons et au métabolisme lipidique.
• Les mutations de l'ETFDH provoquent l'acidurie glutarique de type II (déficit multiple en acyl-CoA déshydrogénase, MADD), soulignant son rôle dans les maladies métaboliques.
• Elle se localise à la membrane interne mitochondriale, avec un peptide de transit dirigeant son import mitochondrial.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la phosphorylation, identifiées par protéomique ; l'épissage alternatif génère de multiples isoformes.
• Le poids moléculaire prédit à partir de la séquence d'acides aminés est d'environ 68,5 kDa, ce qui correspond à la bande observée à 68 kDa sur les western blots.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre la région C-terminale (aa 480–617) de l'ETFDH humain, un segment conservé entre l'homme, la souris et le rat, ce qui étaye les données de réactivité croisée.
• Pour le western blot, une bande proche de 68 kDa est attendue ; validez la détection dans les lysats de tissus ou de cellules pertinents et envisagez d'optimiser la quantité de protéine chargée et les conditions de blocage.
• Lors de l'immunofluorescence ou de l'immunohistochimie, assurez une perméabilisation adéquate et, pour l'IHC-P, optimisez la récupération antigénique ; validez la coloration avec des échantillons témoins positifs et négatifs appropriés.
• Dans les applications ELISA, testez les formats directs ou sandwich et titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale pour votre test spécifique.
• Étant donné la localisation mitochondriale de l'ETFDH, un fractionnement subcellulaire ou un enrichissement mitochondrial peut améliorer la sensibilité de détection dans certains types d'échantillons.

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