Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-ERp29 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P30040

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ERp29

• L'ERp29, également connu sous le nom d'ERp28, ERp31, PDIA9 et PDI-DB, est une protéine résidente du réticulum endoplasmique (RE) codée par le gène ERP29 (C12orf8) chez l'homme.
• Elle ne présente pas d'activité d'isomérase disulfure mais joue plutôt un rôle critique dans le traitement et le repliement des protéines sécrétaires dans la lumière du RE.
• L'ERp29 se localise principalement dans la lumière du RE et a également été détectée dans les mélanosomes, indiquant une implication dans les voies de sécrétion et de pigmentation.
• La protéine est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux plus élevés dans les tissus sécréteurs, ce qui correspond à sa fonction proposée dans la sécrétion des protéines.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, et le gène subit un épissage alternatif, générant de multiples variants de transcrits.
• Des études structurales (mot-clé structure 3D dans UniProt) ont résolu son organisation en domaines, aidant à comprendre ses interactions fonctionnelles.
• Le poids moléculaire prédit est d'environ 29 kDa (UniProt : 28993 Da), correspondant au poids protéique observé dans les contextes expérimentaux.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 33–261, couvrant la protéine mature après élimination du peptide signal ; il est censé reconnaître à la fois l'ERp29 native et dénaturée dans des applications comme le WB et l'IF/ICC.
• Pour le Western blot (WB), une bande proche de 29 kDa est attendue ; utilisez des tampons de lyse optimisés pour les protéines luminales du RE et incluez des inhibiteurs de protéases/phosphatases.
• En immunohistochimie (IHC-P), la récupération antigénique (par exemple, tampon citrate induit par la chaleur) peut améliorer la coloration dans les tissus FFPE ; validez en utilisant des tissus sécréteurs avec une expression élevée connue d'ERp29.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), la perméabilisation est essentielle pour accéder à la lumière du RE ; une co-coloration avec des marqueurs du RE (par exemple, la calnexine) peut confirmer la spécificité de localisation.
• Les tests basés sur l'ELISA peuvent être optimisés en utilisant l'immunogène recombinant comme étalon de référence ; les étapes appropriées de blocage et de lavage doivent être déterminées empiriquement.
• La réactivité croisée signalée avec l'ERp29 de souris et de rat (identité de séquence de 84% et 83%, respectivement) soutient les études inter-espèces ; cependant, une validation dans le système d'échantillon pertinent est recommandée.

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