Anticorps polyclonal de lapin anti-ERK2 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P28482

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ERK2

• ERK2 (MAPK1) est une sérine/thréonine kinase et un composant essentiel de la cascade de signalisation MAPK/ERK. Il agit aux côtés d'ERK1 (MAPK3) pour réguler divers processus cellulaires, notamment la croissance, l'adhésion, la survie et la différenciation, via la phosphorylation de plus de 160 substrats. Références associées : PMID:35831023
• La kinase phosphoryle un large éventail de cibles cytoplasmiques, nucléaires et organellaires, telles que les facteurs de transcription (ATF2, ELK1, FOS), les protéines du cytosquelette (MAP2, CTTN), les régulateurs de l'apoptose (BAD, MCL1) et les contrôleurs de la traduction (EIF4EBP1), orchestrant ainsi l'expression génique, la dynamique du cytosquelette et l'apoptose.
• Dans des conditions hypoxiques, ERK2 phosphoryle PGK1 au niveau des mitochondries pour supprimer la formation d'acétyl-coenzyme A à partir du pyruvate (PubMed:26942675). Références associées : PMID:26942675
• ERK2 agit également comme répresseur transcriptionnel, se liant aux séquences consensus [GC]AAA[GC] pour réguler à la baisse les gènes induits par l'interféron gamma tels que CCL5, IRF7 et OAS1, indépendamment de son activité kinase.
• La localisation subcellulaire dépend du contexte : ERK2 se trouve dans le cytoplasme, associé au cytosquelette et au fuseau mitotique, dans le noyau, au niveau des centrosomes, des cavéoles membranaires et des adhésions focales, ce qui reflète ses divers rôles de signalisation.
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent la phosphorylation (motif TEY de la boucle d'activation), l'acéylation et l'ubiquitination, avec des implications sur la durée du signal et la localisation cellulaire. Il est classé sous les mots-clés : Kinase, Protéine kinase sérine/thréonine, Phosphoprotéine, Acéylation, Conjugaison à l'ubiquitine, etc.

Conseils expérimentaux et techniques

• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prévu est de 41 kDa ; envisagez d'utiliser des lysats de cellules entières de cellules HeLa, HEK293 ou Jurkat comme contrôles positifs, car ERK2 est exprimé de manière ubiquitaire.
• En immunohistochimie (IHC-P), testez une gamme de méthodes de récupération d'antigène et de dilutions d'anticorps, car la localisation d'ERK2 est à la fois nucléaire et cytoplasmique ; des coupes de tissus normaux et tumoraux appropriés doivent être validées.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), des conditions optimales de fixation et de perméabilisation préserveront les signaux ERK2 nucléaires et cytosquelettiques ; envisagez une co-coloration avec des marqueurs spécifiques de compartiments.
• L'application ELISA peut être adaptée pour la détection quantitative ; associez-la à un anticorps de capture ERK2 et validez-la dans des matrices de protéines recombinantes et d'échantillons natifs.
• L'immunogène se situe entre les résidus 200 et 300, une région distincte du motif TEY régulateur ; cet anticorps peut reconnaître à la fois l'ERK2 phosphorylé et non phosphorylé – validez le comportement dépendant de la phosphorylation si nécessaire.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, la cohérence entre les lots doit être vérifiée pour chaque application ; la validation KO (lorsqu'elle est disponible) confirme la spécificité de la cible.

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